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与传统的纺织医用敷料相比,生物敷料由于具有较好的可降解性、生物相容性和毒副作用小等特点,在大面积创伤治疗中有独特的作用,成为纺织科学与生物医学研究的热点。目前,生物敷料多用胶原、壳聚糖(CS)、海藻酸、透明质酸等材料,以薄膜、海绵、凝胶等形态为主,但其稳定性较差,吸收渗液能力不强。理想创伤敷料一方面要有良好的生物相容性、抗菌性、吸渗能力、通透性、亲肤性、保形性等;另一方面还要防止创伤感染、缩短治疗时间,且能提高创面愈合质量。水凝胶是一种能吸水溶胀的胶状高分子溶胀体,吸收能力强,水蒸气透过率好,气体通过率高,且不粘连伤口,易更换,低毒性,可负载药物,具有很高的医学实用价值。本课题以从蚕蛹中提取的壳聚糖、天然蜂蜜和明胶为材料,创造性地将三种天然物质制作成水凝胶,较为系统的研究了壳聚糖复合水凝胶的最佳制备工艺,进行了水凝胶的抗菌性及毒理学试验,并初步探讨了该凝胶在烫伤治疗上的应用,研究结果如下:
(1)本实验采用冷冻-解冻法制备了蚕蛹壳聚糖/蜂蜜/明胶水凝胶,对明胶水凝胶、CS-明胶水凝胶和壳聚糖/蜂蜜/明胶水凝胶的溶胀性能进行了比较,发现壳聚糖、蜂蜜、明胶的三组分复合水凝胶无论是物理溶胀性,还是保湿性都优于明胶水凝胶和CS-明胶水凝胶;通过正交试验分析了各因素对溶胀性能的影响,发现各组分对溶胀性能影响大小依次为明胶、壳聚糖、蜂蜜。
(2)采用单因素试验法分析了明胶浓度、壳聚糖浓度、蜂蜜浓度、处理温度和成胶时间对水凝胶性能的影响,并采用正交试验法确立了壳聚糖复合水凝胶的最佳制备工艺,即:明胶浓度为25%,壳聚糖浓度为0.75%,蜂蜜浓度为20%,处理温度为37℃,成胶时间为12h。最佳工艺下制备的水凝胶在磷酸缓冲液中,48h的体外降解率为4.21%,将其放于4℃的冰箱中保存时间比室温下放置大约长15-20天。
(3)以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为试验菌种,研究了壳聚糖复合水凝胶对两种细菌的抑菌活性。发现低浓度CS的抑菌效果不如高浓度的蜂蜜,而将两种物质共混制备壳聚糖复合水凝胶时,抑菌效果明显提高,且对St.aureus的抑制作用明显好于E.coli。混合水凝胶中,当壳聚糖含量为0.25%时,24h内对St.aureus抑菌率就达到100%,且在48h和72h观察时,其抑菌效果末减弱,持久性好,含量达到0.5%时,对E.coli有明显的抑菌效果,抑菌率达100%,在48h和72h观察时,抑菌率仍达到100%蜂蜜含量为20%,24h内对St.aureus抑菌率为100%,含量达到30%对E.coli的抑菌率达到100%,在48h和72h观察时,抑菌率未发生变化。
(4)以白兔为受试动物,采用切片检查法,对壳聚糖复合水凝胶及市售烫伤膏对烫伤伤口的愈合作用进行研究。肉眼观察发现,用壳聚糖复合水凝胶治疗创伤伤口,在12d时伤口即基本愈合。经切片观察,愈合的伤口表皮无溃疡,局部毛囊增生,且有新生表皮细胞生成,效果明显好于市售烫伤膏。
(5)从全身毒性试验、破损皮肤刺激试验、热原试验、溶血性试验对壳聚糖复合水凝胶进行毒理学评价,试验结果表明该水凝胶对生物体无毒性作用,无溶血现象发生,作为新型烫伤敷料使用是比较安全的,有很好的推广应用前景。