纳米氧化锌对断奶仔猪肠黏膜屏障的影响

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本课题以21日龄断奶仔猪为试验对象,研究了纳米氧化锌(Nano-Zinc Oxide)对断奶仔猪腹泻率和肠黏膜屏障功能的影响,探讨其对肠黏膜屏障保护作用的机理,为纳米氧化锌在生产中应用提供理论依据。以雄性SD大鼠为研究对象,用脂多糖(LPS)建立肠损伤模型,在尤斯灌流室(Ussing chamber)中研究纳米氧化锌对SD大鼠肠道电生理的影响。   断奶仔猪饲养试验选用108头21日龄平均体重为5.8±0.2 kg的断奶“杜×长×大”三元杂交仔猪,断奶后按胎次一致、体重相近、公母各半的分组方法,采用随机区组设计共设3组,分别为对照组、3000 mg/kg氧化锌组和300 mg/kg纳米氧化锌组。试验仔猪采用群饲,自由采食和饮水。正试期14天,试验前对猪舍进行全面清洗和消毒。试验期间每日记录饲料消耗量,统计腹泻和死亡情况,第7 d和14 d采集粪便、血样等。试验开始和结束时,禁食(自由饮水)12 h,称重,计算日增重、日采食量、料重比等。   SD大鼠试验选取成年、健康、体重200-250 g雄性SD大鼠45只,随机分为3组,静脉注射5 mg/kg BW脂多糖(LPS)构建肠损伤模型。取其小肠黏膜在尤斯灌流室(Ussing chamber)中测定SD大鼠肠道电生理指标。在肠道黏膜的黏膜端和浆膜端分别添加氧化锌溶液、纳米氧化锌溶液和5-羟色胺(5-HT)溶液,研究纳米氧化锌对SD大鼠肠道电生理的影响。   试验结果表明:   1.生长性能:和对照组相比,试验组末重分别提高了1.87%和3.74%,差异不显著(P<0.05);纳米氧化锌组末重比氧化锌组末重提高了1.83%,差异不显著(P<0.05)。试验组日增重分别比对照组提高了5.52%和7.26%,差异显著(P<0.05)。日采食量试验组和对照组相比有所增加,分别增加了3.14%和4.25%,差异均不显著(P>0.05)。和对照组相比,氧化锌组和纳米氧化锌组料重比有所下降,分别下降了1.91%和2.54%,差异均不显著(P<0.05);氧化锌组和纳米氧化锌组相比差异也不显著(P>0.05)。   2.腹泻率:仔猪腹泻率在断奶后第三天达到高峰,随后逐渐降低。在整个试验期内,两组试验组的腹泻率均显著(P<0.05)低于对照组,在断奶后第三天试验组和对照组的腹泻率差异最大。整个试验期内,氧化锌组腹泻率高于纳米氧化锌组,差异不显著(P>0.05),提示断奶引起了仔猪严重的腹泻;3000 mg/kg氧化锌和300 mg/kg纳米氧化锌对断奶后腹泻有较好的抑制作用;3000 mg/kg氧化锌和300 mg/kg纳米氧化锌的作用效果无显著差异。   3.血清皮质醇:与对照组相比,在断奶后第7天(D7)和断奶后第14天(D14)试验组血清皮质醇含量显著(P<0.05)降低。断奶后第7天(D7)和断奶后第14天(D14)氧化锌组和纳米氧化锌组之间血清皮质醇含量差异均不显著(P>0.05)。   4.前炎症细胞因子:与对照组相比,在断奶后第7天(D7)和断奶后第14天(D14)试验组血清IL-1β含量显著(P<0.05)降低。断奶后第7天(D7)和断奶后第14天(D14)氧化锌组比纳米氧化锌组血清IL-1β含量高9.1%和10.5%,差异均不显著(P>0.05)。与对照组相比,在断奶后第7天(D7)和断奶后第14天(D14)试验组血清IL-6含量均显著(P<0.05)降低。断奶后第7天(D7)和断奶后第14天(D14)氧化锌组比纳米氧化锌组血清IL-6含量高5.2%和4.1%,差异均不显著(P>0.05)。   5.粪便大肠杆菌菌落数:在断奶后第7天,氧化锌组粪便大肠杆菌菌落数比对照组降低1.9%,差异不显著(P>0.05);纳米氧化锌组粪便大肠杆菌比对照组降低5.8%,差异显著(P<0.05)。在断奶后第14天,氧化锌组粪便大肠杆菌落数比对照组降低3.8%,差异不显著(P>0.05);纳米氧化锌组粪便大肠杆菌菌落数比对照组降低7.2%,差异显著(P<0.05)。提示纳米氧化锌对断奶仔猪粪便大肠杆菌具有抑制作用。   6.SD大鼠小肠基础电生理指标:试验组1(LPS组)跨膜电阻与空白组差异显著(P<0.05),试验组2(LPS+纳米氧化锌组)与空白组和试验组1差异均不显著(P>0.05),试验组2跨膜电阻比试验组1高17.9%,比空白组低11.0%,提示LPS破坏了SD大鼠小肠黏膜,添加纳米氧化锌对LPS造成的小肠黏膜的破坏具有一定的保护作用。试验组1基础短路电流与空白组和试验组2相比均差异显著(P<0.05),而试验组2和空白组相比差异不显著(P>0.05)。提示脂多糖的添加破坏了大鼠的肠黏膜屏障,而纳米氧化锌对此破坏具有保护作用。   7.小肠短路电流:空白组S-NanoZn处理造成的短路电流的变化显著(P<0.05)大于M-Zn处理和S-Zn处理,在试验组1和试验组2中也有相同的趋势。空白组中M-Zn处理、S-Zn处理和M-NanoZn处理间差异不显著(P>0.05)。试验组1中S-NanoZn处理造成的短路电流的变化显著(P<0.05)大于其他处理,且S-Zn处理和M-NanoZn处理的△Isc显著(P<0.05)大于M-Zn处理。试验组2与试验组1类似,S-NanoZn处理造成的△Isc显著(P<0.05)大于其他处理,其中S-Zn处理和M-NanoZn处理的△Isc显著(P<0.05)大于M-Zn处理。   8.5-羟色胺(5-HT)引起的小肠短路电流变化:添加5-HT后,各个组均出现了短路电流的明显变化。在空白组,M-Zn处理和S-Zn处理由5-HT引起的△Isc显著(P<0.05)大于M-NanoZn处理和S-NanoZn处理,M-Zn处理和S-Zn处理间、M-NanoZn处理和S-NanoZn处理间差异不显著(P>0.05)。在试验组1,M-Zn处理和S-Zn处理的△Isc显著(P<0.05)大于M-NanoZn处理,S-NanoZn处理与其他差异不显著。在试验组2,M-Zn处理和S-Zn处理的△Isc显著(P<0.05)大于M-NanoZn处理和S-NanoZn处理,M-Zn处理和S-Zn处理间、M-NanoZn处理和S-NanoZn处理间差异不显著(P<0.05)。   本研究结果提示:   1.断奶仔猪日粮中添加300 mg/kg纳米氧化锌能提高日增重,效果与3000mg/kg氧化锌相当。   2.断奶仔猪日粮中添加300 mg/kg纳米氧化锌对断奶后腹泻有较好的抑制作用;作用效果与3000 mg/kg氧化锌相当。   3.断奶仔猪日粮中添加300 mg/kg纳米氧化锌能降低断奶后第7天(D7)和断奶后第14天(D14)血清IL-1β含量和IL-6含量。   4.日粮中添加300 mg/kg纳米氧化锌能降低断奶仔猪粪便大肠杆菌数量。   5.纳米氧化锌能降低SD大鼠小肠基础短路电流,提高跨膜电阻。   6.无论在黏膜端还是浆膜端添加纳米氧化锌均可影响SD大鼠小肠短路电流。   7.纳米氧化锌能抑制5-羟色胺(5-HT)引起的SD大鼠小肠短路电流的增加。
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