目的:本课题以黑骨藤(Periploca forrestii Schltr.)为研究对象，通过实验，建立10批黑骨藤药材的UPLC-MS/MS化学指纹图谱及血清指纹图谱，探讨其药效物质基础，对黑骨藤(Periploca forresti Schlt.)进行了相关药效学、药动学研究，并采用UPLC-MS/MS技术探究口服黑骨藤(Periploca forrestii Schtr.)在体内的药物动力学过程。
　　方法:1.采用80％乙醇提取10批黑骨藤药材得到提取液，再分别灌胃SD大鼠，通过筛选相应的色谱、质谱条件，建立了10批黑骨藤药材的UPLC-MS/MS化学指纹图谱及血清指纹图谱，并得到后续分析所需的指标性成分。
　　2.建立大鼠类风湿性关节炎模型，测量大鼠状态和体重，足踝关节肿胀度，并在不同的时间点眼眶取血采集血清样品用ELISA法测定IL-6、TNF-α含量，取大鼠踝关节制作病理组织切片，并以以上指标为药效指标进行相应药效学研究。
　　3.将36只SD大鼠随机分为6组(正常组，模型组，黑骨藤低剂量给药组，黑骨藤中剂量给药组，黑骨藤高剂量给药组，雷公藤多苷片阳性给药组)，并分别灌胃相应剂量的生理盐水，黑骨藤提取液，雷公藤多普阳性药，于不同的时间点眼眶取血采集血浆样品，采用UPLC-MS/MS的多反应监测模式(MRM)定量分析，以葛根素为内标物在正离子模式下建立了黑骨藤中绿原酸浓度的测定方法，并且测定了四个代谢物在不同时间点的峰面积变化。研究了黑骨藤中绿原酸在大鼠体内的药物代谢动力学情况。
　　结果:1.色谱柱为ACQUITY UPLC CSH C18色谱(150mm×3.0mm,1.7μm);柱温:25℃,样品室温度10℃，进样量2μL，流速梯度洗脱，以水(A，含0.2％甲酸)-乙腈(B)为流动相，梯度洗脱。建立了黑骨藤药材UPLC-MS/MS化学指纹图谱及血清指纹图谱，且10批药材化学指纹图谱相似度均在0.9以上，并对其共有峰进行了聚类分析，通过对照品及文献的比对得知，3号峰为绿原酸，7号峰为杠柳毒苷。
　　2.黑骨藤药效学研究表明，黑骨藤药材低、中、高给药剂量组对大鼠类风湿性关节炎均有一定疗效。黑骨藤高剂量给药组及阳性药给药组大鼠体重均增长缓慢，且在发病期除黑骨藤高剂量给药组及阳性药给药组外大鼠体重均出现下降情况，而后体重又缓慢增加;在足踝肿胀度实验中黑骨藤低、中、高剂量组与阳性药组均表现出良好的足踝肿胀抑制作用;在ELISA实验中黑骨藤低、中、高剂量组与阳性药组也能不同程度的降低大鼠血清中的IL-6及TNF-α含量水平;而在大鼠足踝关节病理组织切片的观察中也发现，与模型组相比，阳性药雷公藤多苷组和黑骨藤低、中、高剂量组的血管增生都有所改善，炎细胞浸润情况减轻。
　　3.经分析测定后，血浆中的绿原酸在0.018-6.750μg/mL范围内线性关系良好，精密度、稳定性等试验结果表明，绿原酸的血药浓度测定的方法稳定可靠。经模型拟合黑骨藤中绿原酸低、中剂量组在大鼠体内符合单室模型，绿原酸高剂量组在大鼠体内符合二室模型。用WinNonlin软件分析药代动力学参数，得到低剂量组中AUC为0.354μg/mL·h,K01_HL为0.981h，K10_HL为0.983h，CL_F为18067.65mL/h/kg，Tmax为1.416h,Cmax为0.092μg/mL,中剂量组AUC为1.120μg/mL·h,K01_HL为1.143h,K10_HL为1.144h,CL_F为10917.020mL/h/kg，Tmax为1.649h，Cmax为0.268h，高剂量组中AUC为2.528μg/mL·h,K01_HL为1.158h,K10_HL1.276h,CL_F为9887.607mL/h/kg,Tmax为0.501h，Cmax为0.090h。并测量得到血浆中四种代谢物不同时间点的峰面积。
　　结论:1.首次建立了黑骨藤药材的UPLC-MS/MS化学指纹图谱及血清指纹图谱，对黑骨藤药材质量的控制提供了一定的依据。
　　2.从几个药效学指标判断黑骨藤低、中、高剂量组对大鼠类风湿性关节炎有一定疗效，而起药效作用的成分除绿原酸外有可能是血清中的代谢产物，需进行后续的结构鉴定与鉴别。
　　3.通过比较大鼠体内的药动学参数，黑骨藤低、中、高剂量的达峰时间差别不大，均在1.5h左右。从15min至1440min共12个时间测得的血浆中代谢物四的峰面积值一直很高，在第1440min峰面积值最大。