Ezrin蛋白在皮肤癌组织中的表达及生物学功能

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目的:探讨细胞膜和细胞骨架之间的连接蛋白Ezrin在皮肤癌中的表达,明确Ezrin蛋白对人表皮癌A431生长和运动能力的影响,考察黄芩素通过Ezrin蛋白的对A431细胞生长的影响。方法:1、为明确Ezrin蛋白在皮肤癌组织中的表达,采用免疫组化法检测36例鳞状细胞癌(Squamous Cell Carcinoma,SCC)、27例基底细胞癌(Basal cell carcinoma,BCC)和20例脂溢性角化病(SeborrheicKeratosis,SK)、10例正常人皮肤(normal skin,NS)中Ezrin及phos-Ezrin蛋白表达水平。2、为探讨Ezrin蛋白在癌变中的生物学作用,选取人表皮癌A431细胞作为研究材料,先运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法分析黄芩素(Baicalein,BAI)对A431细胞生长的影响,选用BAI细胞无毒性浓度(non-cytotoxic concentration,NCC)进行实验;免疫印迹(Western-blotting,WB)分析A431细胞中Ezrin和phos-Ezrin的表达;扫描电镜观察BAI对A431细胞伪足形成,细胞划痕实验检测BAI对A431细胞爬行运动的作用,明确Ezrin蛋白在细胞伪足形成和细胞爬行中的作用。结果:1、Ezrin,phos-Ezrin在NS、SK、BCC、SCC中的阳性表达率分别为20.0%,10.0%;25.0%,15.0%;66.7%,77.7%和91.3%,97.2%,各组之间比较差异有显著性(P<0.01)。2、Ezrin,phos-Ezrin表达水平随着SCC分级程度增高,有淋巴转移的比无淋巴转移的表达强,各组两两比较差异显著(P<0.01)。3、MTT结果表明。BAI在浓度0.1~0.5μg/ml对A431细胞生长抑制作用不明显,为BAI对A431的细胞无毒性浓度(NCC)。WB印迹分析表明,BAI在NCC能明显抑制A431细胞phos-Ezrin表达,且呈浓度依赖性;电镜观察显示A431细胞伪足明显缩短,数量减少;划痕实验显示BAI对A431细胞迁移有明显的抑制作用。结论:1、Ezrin,phos-Ezrin高表达与皮肤癌的恶性程度和淋巴转移有关,可能是皮肤癌SCC发生和发展过程的重要分子“事件”。2、BM可以在NCC抑制Ezrin蛋白磷酸化。3、BAI可能通过抑制phos-Ezrin表达,抑制A431细胞伪足形成和爬行运动,从而抑制肿瘤浸润转移。
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