益生芽孢杆菌的筛选、鉴定及发酵条件优化的研究

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本研究从健康土鸡肠道中分离到67株芽孢杆菌,通过对抗逆性、产酶、抗菌活性等性能进行检测,筛选到两株具有潜在益生效果的芽孢杆菌LBS53和LBS8。LBS53和LBS8对模拟胃肠道环境具有良好的稳定性,且可以耐受饲料中的高铜环境。其中LBS53对致病菌具有较强抑菌特性,可以产蛋白酶,淀粉酶和纤维素酶,酶系较全;LBS8无明显抑菌特性,但有较高的产蛋白酶能力。这两株菌基本具备作为饲用芽孢杆菌制剂菌株的条件。尤其LBS53的优良生物学特性使其在饲料工业中具有良好的应用前景。通过生理生化试验和16S rDNA分子生物学鉴定,结果表明菌株LBS53和LBS8分别为枯草芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌。对LBS53和LBS8进行提高菌体生物量的液体发酵工艺与条件的研究,最终确定LBS53液体发酵培养基配方为:玉米粉2%,黄豆粉4%,K2HPO4:KH2PO4为0.1%:0.075%,MgSO4·7H2O 0.025%,MnSO4 0.001 mmol/L,NaCl 0.6%;发酵条件为:温度40℃,pH 7.5,摇瓶装量30 mL/250 mL,接种量5%,摇床转速180 r/min,时间24 h。优化后总菌体浓度达8.5×109CFU·mL-1。LBS8液体发酵培养基配方为:糖蜜2%,黄豆粉5%,K2HPO40.2%,KH2PO4 0.075%,MgSO4·7H2O 0.025%,NaCl 0.6%;发酵条件为:温度40℃,pH7.5,摇瓶装量30 mL/250 mL,接种量5%,摇床转速180 r/min,时间24 h。优化后总菌体浓度达3.3×109CFU·mL-1
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