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肥胖是由于脂肪代谢紊乱导致脂肪组织增生的一种现象,与胰岛素抵抗、II型糖尿病、动脉粥样硬化以及高血压血脂等代谢疾病有密切联系。大量研究数据显示,农药等环境污染物对上述代谢疾病的发生发展有重要作用。高效氯氟氰菊酯(lambda-cyhalothrin,LCT)属于拟除虫菊酯类杀虫剂,具有慢性毒性,能促进脂肪生成和积累,对人体内脂肪代谢稳态具有破坏作用。目前,高效氯氟氰菊酯对脂肪代谢影响机制尚不完全清楚。本课题以3T3-L1脂肪前驱细胞系为实验材料,通过地塞米松、胰岛素和3-异丁基-1-甲基黄嘌呤的诱导分化为成熟的3T3-L1脂肪细胞,在两种浓度20μM和100μM的LCT、不同时间的作用下,从细胞活性、细胞分化和脂肪生成等方面对LCT的作用机制进行了研究。1)用CCK8方法检测LCT是否对3T3-L1脂肪细胞增殖有毒副作用,以20μM和100μM的LCT分别作用3T3-L1脂肪细胞24 h、48 h和72 h,检测细胞活力;2)以20μM和100μM的LCT分别处理3T3-L1脂肪细胞4、6、8天,利用油红染色观察LCT对细胞分化影响,用甘油三酯试剂盒检测脂滴积累量的变化。在此基础上,用实时定量PCR和western-blot方法检测LCT对脂肪代谢相关基因PPARγ、C/EBPα、Fsp27、ADRP、Perilipin、Fabp4、Adiponectin表达的影响;3)利用抑制剂GW9662抑制PPARγ通路,观察细胞内脂滴积累的变化,并检测通路相关基因和蛋白的表达水平。CCK8检测数据显示,两种浓度20μM和100μM的LCT作用脂肪细胞48 h和72 h后,均对3T3-L1脂肪细胞活力有明显的抑制作用。油红染色和甘油三酯含量检测数据分析发现两种浓度的LCT均能够促进脂肪细胞分化和脂滴积累。定量PCR和WB数据表明,两种浓度的LCT引起PPARγ、C/EBPα、Fsp27、ADRP、Perilipin、Fabp4、Adiponectin基因的高表达。当PPARγ信号通路被GW9662有效抑制后,脂肪代谢相关基因PPARγ、C/EBPα、Perilipin、Fabp4、Adiponectin的mRNA和蛋白表达水平显著下降,并且细胞内脂滴积累量明显降低。本课题结果提示,LCT可能通过激活PPARγ信号通路,促进脂滴过度积累,引起脂代谢紊乱,从而导致肥胖的发生。本研究为更好的理解高效氯氟氰菊酯(LCT)对脂肪代谢影响机制提供了重要的参考。