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目的:研究PM2.5对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的影响及其潜在的机制,为评价PM2.5对人心血管疾病的潜在影响提供科学数据,为相关管理部门的科学决策提供理论依据。方法:PM2.5悬液浓度为:0.2、1、5、25μg/m L,PPS缓冲液为阴性对照。采用MTT法检测PM2.5对HUVEC细胞增殖的影响。Hoechst 33258染色,荧光显微镜观察HUVEC细胞的凋亡小体。V-FITC-PI双染-流式细胞术检测HUVEC细胞的凋亡率。免疫印迹(Western blot)法检测HUVEC细胞内凋亡通路相关蛋白的表达。结果:MTT结果显示,HUVECs的活力随PM2.5处理的浓度和时间增加而降低,呈明显的浓度-效应和时间-效应关系,与对照组相比(P<0.05,P<0.01)。荧光显微镜下,PM2.5悬液处理组的HUVEC细胞内可见典型的凋亡小体。而且HUVEC细胞的凋亡率随PM2.5处理的浓度增加而增加,呈明显的剂量-效应关系,与对照组相比(P<0.05,P<0.01)。PM2.5作用下,HUVEC细胞内,p53、p38总蛋白和蛋白磷酸化(Phospho-p53【Ser15】、Phospho-p38 MAPK)水平都升高;Bax蛋白升高,而Bcl-2蛋白降低,至Bax/Bcl-2比值升高;总Caspase 9、Caspase 3、Caspase 7和PARP蛋白水平降低,而其活化片段Cleaved Caspase 9、Cleaved Caspase 3、Cleaved Caspase 7和Cleaved PARP水平升高。结论:1.PM2.5能诱导HUVEC细胞凋亡,且具剂量-效应关系。2.PM2.5致HUVECs凋亡的分子信号通路:通过促进p53和p38蛋白的磷酸化,从而使Bax表达升高,Bcl-2表达降低,使细胞内Bax/Bcl-2比值升高,进一步活化Caspase-9,通过Caspase-3和Caspase-7途径及PARP蛋白,最终使细胞HUVEC凋亡。