在病毒性疫苗的研究开发工作中,人二倍体细胞作为病毒抗原的制备基质是整个疫苗研发及生产质量控制的首要选择。对作为疫苗制备基质的人二倍体细胞的遗传稳定性及其病毒感染生物学反应特征的相关分析,将为病毒疫苗的研究及开发包括疫苗安全性的研究提供更为丰富的资料。从细胞生物学的角度看,细胞特定酶学反应特征被认为可以反映细胞的遗传学特性和生物学性状。现有的资料表明,当细胞面临病毒感染时,其具有天然免疫反应性质的生物学反应事实上是与其自身的生物学性状相关的。其中细胞所产生的干扰素反应,在病毒疫苗制备技术工艺上又是一个具有重要意义的质量指标,而该指标与细胞增殖过程中的生物学活性状态具有直接的相互联系。因此,分析细胞酶活性特征与其在病毒感染时的干扰素反应强度,显然对这类细胞用于疫苗制备时的技术研究具有重要的意义。因此本文采用多种细胞系,多代细胞,通过生化方法检测细胞内乳酸脱氢酶、超氧化物歧化酶、琥珀酸脱氢酶的酶活力变化以鉴定细胞的稳定性。实验结果表明,人胚肺二倍体细胞(KMB17细胞)和新型的人胚肺二倍体细胞(N0细胞)在细胞代次超过30代后,细胞内的酶活力会发生一定的变化,乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶的酶活力上升,超氧化物歧化酶的酶活力下降,表明这两种细胞在细胞代次超过30代后,细胞的增殖、代谢等能力会下降,细胞稳定性较差,不利于用于疫苗的研发和生产。Vero细胞和Hela细胞随着细胞代次增加酶活力无明显变化,表明这两种细胞在实验所采用的细胞代次内,细胞的增殖、代谢等能力基本保持稳定。本文重点分析了各种酶活性指标的变化与细胞在RNA病毒和DNA病毒感染时所产生的干扰素反应的相互联系,以及这些相互联系所导致的病毒感染滴度的变化情况。做为在细胞核内完成增殖和在细胞质内完成增殖的HSV-1病毒和EV71病毒感染人胚肺二倍体细胞(KMB17、No)时,其引起IFN-α的相对表达量与细胞的酶活力、细胞的生长状态有很大的关系。当人胚肺二倍体细胞培养到第3天时,细胞酶活力处于上升阶段,细胞的生长状态较好,当细胞培养到第5天时,细胞酶活力处于稳定状态,细胞的生长状态也维持相对稳定,两种病毒感染培养到第5天细胞引起细胞分泌的IFN-α的相对表达量比感染培养到第3天细胞引起细胞分泌的IFN-α的相对表达量高,而病毒滴度在感染过程中逐渐上升,但随着干扰素分泌的增加而其增殖逐渐变低的事实,提示了人二倍体细胞在病毒增殖过程中所具有的容纳限度,可能与干扰素的产生浓度相关。当两种病毒感染培养到第3天和第5天的Hela细胞时,其引起细胞分泌的IFN-α的相对表达量与细胞的酶活力关系不大,且比感染其他种类细胞分泌的IFN-α的相对表达量低,这提示了该细胞作为一种肿瘤细胞的非限制型特征。反之,两种病毒感染培养到第3天的Vero细胞引起细胞分泌的IFN-α的相对表达量比感染培养到第5天细胞引起细胞分泌的IFN-α的相对表达量高,且病毒滴度前者也高于后者。这一特征有别于人二倍体细胞,似乎提示了Vero细胞的生物学特性,这些通过研究病毒感染后引起细胞分泌的IFN-α相对表达量的变化与细胞酶活力、细胞生长状态之间的关系的工作,虽然这需要进一步的确证和分析,但相关的数据将又为疫苗的研究和制备提供相应的实验依据。