【摘 要】
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目的构建固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SREBP cleavage activating protein,SCAP)腺病毒,探讨其对ATDC5软骨干细胞增殖及凋亡的影响。为进一步研究SCAP基因的生物学功能
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目的构建固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SREBP cleavage activating protein,SCAP)腺病毒,探讨其对ATDC5软骨干细胞增殖及凋亡的影响。为进一步研究SCAP基因的生物学功能奠定基础,也为探讨SCAP介导的脂代谢与骨关节炎的关系提供一定的实验基础和理论依据。方法应用AdEasyTM腺病毒载体系统,构建并包装Ad-SCAP和靶向SCAP的siRNA腺病毒siSCAP1和siSCAP2,RT-PCR和Western blot法检测其在ATDC5细胞中的表达。FCM检测SCAP重组腺病毒对ATDC5细胞增殖和凋亡的影响;Western blot检测SCAP重组腺病毒感染ATDC5细胞时,凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3,p-JNK的表达。结果成功构建重组腺病毒Ad-SCAP和Ad-siSCAP;Ad-SCAP处理组ATDC5细胞凋亡率明显增加(P<0.05),增殖率明显降低(P<0.05);Ad-si SCAP处理组ATDC5细胞增殖率明显增加(P<0.05),凋亡率明显降低(P<0.05)。结论ATDC5细胞中,过表达SCAP能促进其凋亡抑制增殖而减少SCAP的表达则抑制ATDC5细胞的凋亡、促进增殖。
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