目的:多中心研究碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌(Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)的耐药性、感染危险因素、分子流行病学及耐药机制。方法:收集内蒙古东部地区5家哨点医院2014年-2019年的182株CRE,采用VITEK MS质谱仪对CRE进行鉴定,K-B纸片扩散法和E test条测定药敏复核后共155株;采用病例-对照研究分析CRE感染的危险因素;Carba NP试验和改良碳青霉烯灭活试验检测菌株产的碳青霉烯酶,聚合酶链式反应qPCR检测碳青霉烯酶基因,测定qPCR阳性产物序列,确定菌株基因型别;MALDI-TOF MS分析CRE的同源性。结果:CRE敏感性较高的药物:米诺环素和阿米卡星总体敏感率分别为53.06%和52.25%,其余临床常用抗菌药物高度耐药。年龄≥60岁、使用氨基糖苷类、β内酰胺类抗菌药物和侵袭性操作是诱发内蒙古东部地区CRE感染的危险因素。Carba NP试验和改良碳青霉烯灭活试验检测碳青霉烯酶阳性率均为64.3%,碳青霉烯酶基因检测阳性率78.6%,碳青霉烯酶基因型主要为NDM(87.9%)和OXA(66.7%),未检测到VIM-1和KPC-2,6株肺炎克雷伯菌同时携带IMP、NDM和OXA三种耐药基因。MALDI-TOF MS将85株肺炎克雷伯菌分为4型,Ⅰ型80株;47株阴沟肠杆菌分为3型,Ⅰ型45株;16株大肠埃希菌分为3型,Ⅰ型13株。结论:155株CRE对临床多数常用抗菌药物高度耐药,且具有多重耐药现象,但耐药率低于全国水平。阐明了本地区CRE感染的危险因素。推测产碳青霉烯酶为本地区CRE感染的主要耐药机制,尤其发现6株肺炎克雷伯菌同时携带IMP、NDM和OXA三种耐药基因,提示相关部门应加强对CRE感染的管理、提高监测和预防力度。MALDI-TOF MS分析显示内蒙古东部地区肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌和大肠埃希菌菌株均以一个型别为主,存在克隆传播的现象,但未发现爆发流行。MALDI-TOF MS分析耐药菌株同源性具有操作方便、省时、成本低等特点,实验室应充分利用此技术尽早调查出耐药菌传播途径,避免院感事件爆发。