目的：以“有故无殒”中医理论为基础,研究何首乌致肝损伤的发生与中医肾虚证候的相关性,验证制首乌“毒性-靶向证候-线粒体能量代谢”的关联性假说,并进一步研究何首乌致肝损伤的毒性机制。方法：1.以生首乌和制首乌为研究对象,分别采用不同的造模方法,建立肾阴虚和肾阳虚证候动物病理模型,通过对大鼠行为学指标的观察、大鼠血清T3、T4、CAMP、CGMP、E2、T、Cort含量的检测,确定最适宜的。肾阴虚和肾阳虚证候动物模型造模方法;2.对肾阴虚及肾阳虚证候模型大鼠灌胃给予不同的何首乌药液,制备含药血清；采用倒置显微镜、透射电子显微镜、荧光显微镜等仪器观察各组肝细胞形态的变化；运用流式细胞术及MTT法观察何首乌含药血清作用不同时间诱导L02肝细胞凋亡的情况；并采用DTNB法和2-TBA反应法测定各组肝细胞胞内GSH、GSSG以及MDA的含量,从而研究何首乌诱导肝细胞凋亡的机制；3.建立不同肾虚证候整体动物模型,运用全自动生化分析仪测定大鼠血清ALT、AST、ALP、TBIL、DBIL等生化酶水平；HE染色观察肝组织形态学的改变；分别采用比色法和2-TBA反应测定各组肝组织中GSH—Px活力和MDA的含量：采用TUNEL法测定肝组织细胞凋亡指数；提取各组大鼠肝细胞线粒体,测定肝线粒体中SDH和呼吸链复合物Ⅰ的活力；免疫组化法测定何首乌对肝组织Fas/FasL蛋白表达的影响；实时荧光定量PCR技术检测各组大鼠肝组织Bcl-2 和 Bax mRNA的表达情况,以期进一步研究何首乌导致肝损伤的毒性机制。结果：1.肾阴虚组的大鼠造模后出现白天活动量减少,精神萎靡,夜间活动量增加,饮水量和进食量略增多,体重减轻,尾部潮红,体毛干枯,易激怒等表现,同时T3含量增加,CAMP/CGMP比值升高,与肾阴虚证候临床表现相符合,肾阴虚动物模型造模成功；肾阳虚组的大鼠造模后出现活动减少,体重减轻,尿量增多,体毛稀疏,畏寒蜷缩,睾丸萎缩等表现,同时CAMP含量、CAMP/CGMP比值和T含量均明显降低,与肾阳虚证候临床表现相符合,肾阳虚动物模型造模成功；2.肾阴虚证候制首乌低剂量组的含药血清对肝细胞增殖不仅没有产生抑制作用,反而表现出一定的促进作用,结合制首乌具有滋补肝肾之阴的特点分析认为：当制首乌给药剂量低于一定程度对证治疗肾阴虚证候时,机体代谢产物中导致肝损伤的物质成分较少,以促进肝细胞生长的物质成分为主,考虑与制首乌具有部分保肝作用的成分有关；肾阴虚状态下,大鼠灌胃高剂量的制首乌药液后,其含药血清对L02细胞的增殖具有一定的抑制作用；而肾阳虚状态下,大鼠灌胃给予相同剂量的制首乌药液时,其含药血清对L02细胞的增殖具有明显的抑制作用；3.整体动物实验中,用制首乌治疗肾阴虚证候时,疗程3个月,低剂量组和中剂量组的大鼠血清ALT和AST水平与空白组比较无明显差异,提示大鼠肝细胞无明显损伤；但当制首乌高剂量组的大鼠血清ALT水平明显升高,提示大鼠肝细胞膜被大量破坏,肝功能出现了明显的异常；当用制首乌治疗肾阳虚证候时,制首乌中剂量的大鼠血清ALT和AST水平明显升高,大鼠的肝功能出现明显损伤；制首乌高剂量组大鼠的肝细胞抗氧化能力明显下降,肝脏中脂质过氧化代谢物明显增多,肝细胞出现损伤,细胞凋亡指数明显上升,Fas和FasL蛋白表达明显增强,Bax mRNA表达水平和Bcl-2/Bax比值均出现显著性升高,Bcl-2 mRNA表达水平均出现显著性下降；生首乌组大鼠灌胃给药3个月后,肝细胞抗氧化能力下降,脂质代谢产物增多,肝细胞出现明显损伤,肝组织出现灶性坏死,且肝细胞受损程度高于制首乌给药组。结论：1.制首乌致肝损伤的程度与中医肾虚证候具有相关性,其中制首乌非对证治疗肾阳虚证候时其肝毒性明显强于对证治疗肾阴虚证候；但制首乌治疗肾阴虚证候,如果超过一定的剂量和疗程,依然会对肝脏造成损伤。2.何首乌致肝损伤的可能机制：(1)与肝细胞中MDA代谢产物增多及GSH活性下降,清除氧自由基能力降低有关；(2)通过降低肝线粒体SDH活力和呼吸链复合物Ⅰ活性,影响NADH呼吸链功能而引起细胞代谢障碍；(3)通过Fas/FasL死亡受体通路,上调Fas、FasL蛋白表达诱导肝细胞凋亡；(4)上调凋亡促进因子Bax,同时下调凋亡抑制因子Bcl-2,通过线粒体通路途径诱导肝细胞凋亡。