磷酸三(2-丁氧基)乙酯(Tris(2-butoxyethyl)phosphate,TBOEP)由于作为有机磷阻燃剂和增塑剂被广泛使用,已逐渐成为一种普遍存在的环境污染物,在空气、水体、土壤和生物体等中均被检测到。已有研究表明,TBOEP短期暴露引起生殖毒性和内分泌干扰效应,但关于TBOEP长期暴露的研究较少,本实验以斑马鱼为模型,研究环境相关浓度TBOEP长期暴露引起的生殖毒性和母体传递效应。实验选取受精后20 d(20 dpf)的斑马鱼幼鱼暴露于环境相关浓度的TBOEP(0μg/L、0.1μg/L、1μg/L、10μg/L和100μg/L)中120 d,在清水中产卵,得到的子代胚胎在清水中培养120 h。通过观察F0代斑马鱼性腺的病理组织学变化、检测下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴基因转录的改变和血清中雌二醇(E2)和睾酮(T)水平的改变、检测性腺中化学品TBOEP的含量,分析环境相关浓度的TBOEP长期暴露对斑马鱼生殖系统的影响;通过F1代的存活率、畸形率、心率和体长,以及胚胎中的化学品含量,评估TBOEP的母体传递效应。结果如下:1.与对照组相比,所有暴露组的F0代雌鱼体长、体重、性腺指数(GSI)降低,雄鱼无变化。观测性腺病理组织学切片发现,TBOEP暴露后(10μg/L和100μg/L),性腺中卵原细胞和精原细胞比例显著升高,排卵前期的卵母细胞比例显著降低,100μg/L TBOEP暴露组性腺中精子细胞比例显著降低,表明TBOEP延迟性腺发育。2.精巢和卵巢中都有一定浓度的TBOEP蓄积,暴露组雄鱼精巢中TBOEP平均浓度分别为33.70±8.70 ng/g湿重(ww)、53.60±11.15 ng/g ww、55.70±1.87 ng/g ww和83.20±26.42 ng/g ww,雌鱼卵巢中TBOEP的平均浓度分别为2.14±1.03 ng/g ww、2.01±0.62 ng/g ww、2.07±0.86 ng/g ww和3.49±0.75 ng/g ww,精巢中浓度远高于卵巢。3.在10μg/L和100μg/L TBOEP暴露后,雌鱼血清中E2显著升高,所有浓度组的雌鱼中T/E2显著下降;在1μg/L、10μg/L和100μg/L TBOEP暴露后,雄鱼血清中T浓度显著升高,T/E2比值显著升高。HPG轴基因表达的检测结果表明雌鱼和雄鱼HPG轴上脑中上游基因(gnrh3、cyp19b)及性腺中类固醇合成相关的基因(cyp19a、cyp17、cyp11a、cyp11b、17βhsd)和受体基因(fshr、lhr、erα)的转录受到了显著影响。这些结果表明,TBOEP长期暴露可能通过扰乱HPG轴相关基因的表达破坏体内的激素平衡。4.在所有暴露组,F1代存活率、体长显著下降,心率显著上升。化学检测结果显示10μg/L和100μg/L暴露组的F1代胚胎中TBOEP平均浓度分别为0.28±0.01ng/g ww和1.30±0.02 ng/g ww,这可能来源于亲代斑马鱼。