高等植物胁迫信号网络突变体筛选及分析研究转HS1基因植株抗旱工程的初步研究

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与激活序列1(as-1)同源的启动子元件广泛分布于植物防御相关基因和一些植物病原基因的启动子中,对防御相关基因的激活起着重要作用。as-1元件对多种胁迫刺激,如茉莉酸、水杨酸、过氧化氢、生物异源物质以及重金属,都有着强烈的应答,为筛选各种信号网络的交叉突变体提供一个独特的机会。单一的as-1顺式作用元件可以驱动其中的GUS报告基因的表达。我们构建了以GUS报告基因作背景的大规模T-DNA插入突变体库,并建立了有效的突变体高通量筛选方法,用此方法可以筛选出对不同胁迫信号发生不同应答的突变体。并且已经获得了一些对胁迫应答发生变化的突变体,这些突变体对我们从as-1信号传导途径中分离识别新成分很有帮助。我们筛选得到的一个T-DNA插入突变体,其T-DNA插入在基因At4g24275编码序列内,我们将其命名为D8L4,as-1元件可以调节该基因的表达,并且可以改变D8L4突变体中GUS报告基因的表达,但是如果启动子中缺乏as-1元件,则基因的表达就不会发生改变。At4g24275的RNAi转基因植物(8L4-RNAi)的表型也进一步验证了D8L4突变体,我们的研究结果表明用这种高通量筛选突变体的方法来筛选胁迫信号突变体是行之有效的。
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