丹贝益肺颗粒对肺成纤维细胞VEGF、VEGF R1和VEGF R2基因表达的影响

来源 :黑龙江省中医药科学院 | 被引量 : 2次 | 上传用户:aku168
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目的:实验观察丹贝益肺颗粒对肺成纤维细胞增殖抑制作用,进而观察各浓度丹贝益肺颗粒在各个时间段作用后,肺成纤维细胞对VEGF、VEGFR-1和VEGFR-2基因表达影响,从而证实丹贝益肺颗粒在抗肺纤维化方面的有效治疗作用,进而通过实验来研究丹贝益肺颗粒对抗肺纤维化的作用机制。方法:第一阶段,进行肺成纤维细胞培养,以各浓度丹贝益肺颗粒来实验,然后于5%CO2以及37℃的环境理培养72h、48h、24h,显微镜观察其细胞的作用后改变,利用MTT法测试各浓度丹贝益肺颗粒在作用各时间段之后,测肺成纤维细胞的490nm波长吸光度A值。第二阶段,进行肺成纤维细胞培养,以各浓度丹贝益肺颗粒实验,分为(1)丹贝益肺颗粒1mg/ml组,(2)丹贝益肺颗粒1×10-1mg/ml组,(3)丹贝益肺颗粒1×10-2mg/ml组,(4)丹贝益肺颗粒1×10-3mg/ml组,(5)对照组,(6)地塞米松组,利用免疫组化的方法和实时定量PCR方法测试肺成纤维细胞VEGF、VEGFR-1和VEGFR-2表达的改变。结果:丹贝益肺颗粒中浓度组(1×10-2mg/ml)抑制率接近地塞米松组(P>0.05),相比较低剂量组(1×10-3mg/ml)(P<0.05)和高剂量组(1×10-1mg/ml)(P<0.05)更为有效,具有统计学意义;而同等浓度的丹贝益肺颗粒的细胞增殖抑制率随着时间延长而上升,至72h最高。肺成纤维细胞增殖抑制率与丹贝益肺颗粒作用时间成正相关。结论:丹贝益肺颗粒对肺成纤维细胞作用有效,使VEGF、VEGFR-1、VEGFR-2的表达下降,有较显著的抗肺纤维化效果,体现出较明显的抑制作用。
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