不同阶段增生性瘢痕skp2,E2F1的表达及意义

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目的:通过对不同时期增生期瘢痕成纤维细胞的细胞周期相关基因skp2,E2F1及蛋白的表达变化与同时期成纤维细胞所处的细胞周期的相关性进行探讨,为基因干扰治疗用于增生性瘢痕的防治提供前期研究基础。方法:手术切取三个月,六个月,一年及两年的增生性瘢痕及正常皮肤各8例。用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测各时期增生性瘢痕及正常皮肤中skp2,E2F1的mRNA表达;蛋白质免疫印迹(Western blotting)法检测标本中二者蛋白表达水平;用流式细胞术检测各时期增生性瘢痕中成纤维细胞的细胞周期分布情况。结果:(1)随着HS的发展,增生性瘢痕的成纤维细胞中skp2的mRNA及蛋白表达强度由强变弱,其表达趋势基本一致。3个月组、6个月组分别与1年组、2年组及正常组比较差异有统计学意义(P<0.05),前两者之间差异有统计学意义(P<0.05),后三著之间差异无统计学意义(P>0.05)。E2F1的mRNA及蛋白表达在增生性瘢痕早期也是明显高于晚期,而且两者的表达趋势也基本一致。3个月组、6个月组分别与1年组、2年组、正常组比较差异有统计学意义(P<0.05);3个月组与6个月组比较差异无统计学意义(P>0.05);1年组、2年组、正常组之间比较差异也无统计学意义(P>0.05)。(2)流式细胞仪检测结果:3个月、6个月增生性瘢痕成纤维细胞主要分布在S、G2/M期;而1年组、2年组增生性瘢痕及正常组的成纤维细胞多处于G0/G1期。G0/G1、S期比例:3个月组和6个月组比较无差异(P>0.05);3个月、6个月组分别与1年、2年及正常组有差异(P<0.05);1年组与2年组及正常组(P<05);2年组与正常组无差异(P>0.05)。G2M期比例:3个月组高于6个月组(P<0.05);3个月、6个月组分别高与1年、2年和正常组(P<0.05);1年、2年和正常组无差异(P>0.05)。结论:(1)增生性瘢痕早期存在细胞周期调控因子skp2,E2F1的表达异常,可能与增生性瘢痕早期成纤维细胞异常增殖有重要关系。(2)不同时期增生性瘢FB中skp2,E2F1mRNA与蛋白的表达趋势基本一致,并能较好的调控成纤维细胞细胞周期运行。(3)skp2,E2F1是调控增生性瘢痕的处于增生期的重要调控因子,在增生性瘢痕发生发展的早期阶段对这对调控基因进行干扰治疗,有可能会控制增生性瘢痕的发生和发展。
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