4-氨基喹啉类药物萘酚喹是临床上常用的长效抗疟药,通常作为配体药物与青蒿素类抗疟药配伍联用。萘酚喹的药动学研究表明,口服给药后吸收迅速(tmax约2-4h),消除缓慢(t1/2大于255h),体内清除率低(4.49 L.h-1.kg-1)。萘酚喹的生物转化产物和生物转化途径尚缺乏报道。虽然萘酚喹药物动力学有报道,但一般都是选用雄性个体,关于其雌雄个体之间的差异尚未见文献报道。萘酚喹表现出较好的抗疟活性(IC50为4.2 nmol·L-1),但目前尚无关于其在雌雄个体之间活性差异的文献报道。本文对萘酚喹体内外生物转化产物进行了鉴定,获得了萘酚喹的5种代谢产物,发现了参与萘酚喹代谢的主要代谢酶和主要代谢途径。同时,建立了萘酚喹LC-MS/MS生物样品定量分析方法,获得了雌雄个体之间药物动力学的差异。此外,还对萘酚喹在雌雄疟鼠体内的活性进行了评价。1.萘酚喹的生物转化研究采用高分辨液质联用技术对萘酚喹的体内外生物转化产物进行了快速鉴定,并采用了多种数据采集和数据后处理手段对萘酚喹及其代谢物进行鉴定,通过对二级质谱数据的解析,最终推测出代谢物的结构和代谢途径,并通过统计7种重组CYP酶产生的代谢物的种类和量,得到萘酚喹的主要代谢酶。体内外生物转化样本中,一共发现5个I相生物转化产物,没有发现Ⅱ相生物转化产物。发现的代谢物中包括4种羟基化生物转化产物(M1、M2、M3和M5)和1种氮氧化生物转化产物(M4);萘酚喹的主要生物转化途径包括羟基氧化和氮氧化;参与萘酚喹代谢的主要是CYP2D6酶;该研究未见文献报道。2.性别差异对萘酚喹药物动力学影响的研究建立了萘酚喹(NQ)在Wistar大鼠血浆中的LC-MS/MS定量分析方法,并采用该分析方法对雌雄大鼠灌胃给予NQ(40 mg·kg-1)后的药物动力学进行了研究和分析。对样品预处理方法、色谱条件和质谱条件进行了优化。最终条件定为:Wistar大鼠血浆(40 μL)经蛋白沉淀处理之后,经Poroshell 120 SB C18色谱柱分离,以ACN-H2O(含有0.2%HCOOH、0.05%CF3COOH)为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源、正离子方式和多反应监测模式对NQ进行检测。该方法选择性好、灵敏度高。NQ的线性范围为1.0-400.0 ng·mL-1,检测限为0.5 ng·mL-1。使用上述方法对灌胃给予磷酸萘酚喹(PNQ)后雌雄大鼠的血浆进行测定,并采用TOPFIT软件分析得出NQ在雌雄大鼠体内的主要药动学参数。雌雄大鼠NQ 的 Cmax 为 429.50±122.92 ng·mL-1 和 548.83±185.62 ng·mL-1、AUC0-t 分别为30.52±5.99 h·μg·mL-1 和 38.89±9.36 h-μg·mL-1、Tmax 分别为 3.2 h(2.0,6.0)和5.8 h(2.0,12.0)、t1/2 分别为 138.3±25.1 h 和 194.3±44.7 h。实验结果表明,萘酚喹在雄性大鼠体内具有较高的AUC值,并且消除较缓慢。3.萘酚喹在雌雄小鼠体内抗疟活性研究以氯喹为阳性药物建立约氏疟小鼠(Pyoelii BY 265)抗疟活性评价模型,采用该模型对萘酚喹在雌雄小鼠体内的抗疟活性进行评价。以约氏疟原虫感染ICR雌雄性小鼠建立鼠疟模型。24 h后阳性对照组灌胃给予系列浓度的CQ溶液,阴性对照组灌服给予空白溶剂,实验组给予系列浓度的NQ溶液,给药一日;并于第四日尾静脉取血涂片,采用显微镜镜检法观察各组小鼠的疟原虫感染情况,并计算氯CQ和NQ对疟原虫的生长抑制率。实验结果显示,CQ体内抗疟活性良好,90%有效剂量(ED90)为2.18 mg.kg-1,与文献报道的ED90值(2.04 mg·kg-1)一致,提示体内抗疟活性评价模型建立成功。萘酚喹在ICR雌雄小鼠体内具有较好的抗约氏疟活性,在雌雄疟鼠体内的50%有效剂量ED50分别为0.94 mg·kg-1和0.71 mg·kg-1,90%有效剂量ED90分别为1.67 mg·kg-1和1.10 mg.kg-1。实验结果表明,萘酚喹在雄性小鼠体内的活性显著高于雌性小鼠。