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鼻咽癌（Nasopharyngeal carcinoma,NPC）是我国南方地区常见的恶性肿瘤。鼻咽癌治疗失败的主要原因是局部复发和远处转移。因此,如何监测、预防鼻咽癌治疗后远处转移为目前研究的主要方向。研究发现,血小板活化后可促进肿瘤细胞发生上皮-间质转化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）,进而促进外周血循环肿瘤细胞（Circulating tumor cells,CTCs）的增加。此外,COX-2产生的PGE2也可激活EGFR促进肿瘤发生EMT增加外周血CTCs数量。阿司匹林可抑制血小板聚集和COX-2的活性。在较多肿瘤的研究中发现,阿司匹林可改善肿瘤的预后,然而阿司匹林是否可改善鼻咽癌的预后及对CTCs和EMT是否有抑制作用尚未见报道。针对上述关键科学问题,本研究以临床上广泛使用的阿司匹林为研究对象,探讨其对鼻咽癌EMT过程和预后的影响及其可能的机制。第1部分阿司匹林对鼻咽癌患者的血液学相关指标和预后的影响目的回顾性分析服用阿司匹林的鼻咽癌（NPC）治疗前后的血液学相关指标特征和预后情况,探讨阿司匹林是否影响患者的预后。方法通过查阅广西壮族自治区人民医院鼻咽癌研究所收治的562例NPC患者的病历资料并进行随访,共纳入符合标准420例NPC患者,按照是否使用阿司匹林分为,阿司匹林组76例,非阿司匹林组344例。分析治疗前后两组外周血淋巴细胞计数（ALC）、血小板计数（PLT）、血小板与淋巴细胞比例（PLR）、中性粒细胞与淋巴细胞比例（NLR）、纤维蛋白原（FIB）、EB病毒DNA和T细胞亚群;并应用Kaplan-Meier生存曲线进行单因素生存分析,用log-rank检验进行组间生存曲线的比较。结果（1）治疗前PLR和FIB随着临床分期的增加而升高（均P<0.05）;ALC和CD4+CD8+双阳性T细胞在治疗前阿司匹林组高于非阿司匹林组（均P<0.05）;PLR和NLR在治疗后阿司匹林组低于非阿司匹林组（P<0.05）,两组治疗前后EBV-DNA无明显差异。（2）发生复发和转移的患者其PLT和FIB水平高于无复发和转移患者。（3）治疗后阿司匹林组远处转移率为14.5%（11/76）,非阿司匹林组远处转移为25.9%（89/344）（P<0.05）。（4）单因素分析显示,阿司匹林组5年OS、DFS及DMFS均优于非阿司匹林组（均P<0.05）。多因素分析显示,服用阿司匹林、疗前PLR和疗前FIB水平是影响NPC患者总生存率的独立危险因素。结论阿司匹林可改善NPC患者的预后,其机制可能与其降低了PLR、减少远处转移有关。第2部分阿司匹林对鼻咽癌外周血循环肿瘤细胞的影响及其与远处转移的关系目的探讨鼻咽癌患者外周血循环肿瘤细胞（Circulating tumor cells,CTCs）的状态及服用阿司匹林对CTCs的影响。方法本研究采用广州益善生物技术股份有限公司研发的CanPatrolTMCTCs检测技术,选取2014年10月至2015年11月收治的92例鼻咽癌患者为研究对象,选取20例健康体检者为对照组,其中阿司匹林组有18例,非阿司匹林组74例。检测患者治疗前、治疗结束时外周血中的CTCs,分析其与患者临床病理特征的关系;同时分析阿司匹林对CTCs总数和各亚型CTCs数量的影响。结果（1）NPC患者外周血的CTCs检出率为86.96%（80/92）,其中上皮型CTCs检出率为55.43%（51/92）,混合型CTCs检出率为77.17（71/92）,间质型CTCs检出率为40.22%（37/92）;20例健康体检者的CTCs检出率为0%。（2）CTCs与N分期有关,N2+N3患者其CTCs个数明显多于N1患者。CTCs总数、上皮型CTCs个数与PLT正相关（r=0.205;r=0.244）。（3）阿司匹林组治疗后CTCs总数、混合型、间质型及非上皮型CTCs均明显下降（均P<0.05）,非上皮型CTCs比率也明显下降（P<0.05）。（4）未使用阿司匹林和靶向治疗的患者治疗结束时其间质型CTCs比率明显高于使用阿司匹林和（或）靶向治疗患者（P<0.05）。（5）治疗结束时混合型CTCs阳性组和非上皮型CTCs阳性组其远处转移发生率明显高于阴性组（均P<0.05）;治疗结束时混合型CTCs阴性组患者无远处转移生存率高于CTCs阳性组,差异接近有统计学意义（P=0.051）。结论非上皮型CTCs与远处转移有关,阿司匹林可能是通过抑制EMT减少CTCs进而降低远处转移发生的风险。第3部分鼻咽癌组织中COX-2、EGFR、E-cadherin和Vimentin的表达及其与循环肿瘤细胞的关系目的观察COX-2、EGFR、E-cadherin和Vimentin在鼻咽癌组织中的表达及其与外周血循环肿瘤细胞的关系。方法采用免疫组化染色检测COX-2、EGFR、E-cadherin和Vimentin在鼻咽癌组织中的表达。结果（1）鼻咽癌COX-2、EGFR、E-cadherin和Vimentin的阳性表达率分别为85.3%、92.6%、100.0%和20.6%。（2）Vimentin表达与淋巴结分期有关（P<0.05）;COX-2与EGFR表达呈正相关（Rs=0.515,P<0.05）,两者的共表达与Vimentin表达也呈相关关系（Rs=0.277,P<0.05）。（3）Vimentin高表达的患者其非上皮型CTCs比率高于Vimentin低表达患者。（4）COX-2高表达组阿司匹林促进CTCs下降数量多于COX-2低表达组。（5）Vimentin阳性组患者无远处转移生存率低于阴性组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论阿司匹林可能通过抑制COX-2下调Vimentin减少EMT发生,降低间质型CTCs比率进而减少远处转移的发生。第4部分COX-2对鼻咽癌细胞迁移能力影响的体外功能研究目的观察沉默COX-2的表达后对鼻咽癌细胞迁移能力的改变。方法对所使用的HK1进行短串联重复序列（Short Tandem Repeat,STR）位点分析;运用shRNA逆转录病毒包装质粒沉默HK1细胞的COX-2基因表达。利用Western-Blotting鉴定COX-2沉默表达效果。细胞划痕和Transwell实验检测COX-2表达的变化对鼻咽癌细胞迁移能力的影响。结果（1）使用的细胞系为鼻咽癌HK1的单一细胞系,无交叉污染。（2）感染逆转录病毒包装的PTGS2-shRNA后,HK1细胞的COX-2蛋白表达明显下调。（3）HK1下调COX-2表达后,其迁移能力明显下降。结论鼻咽癌细胞系HK1存在COX-2表达;沉默COX-2可抑制鼻咽癌细胞的迁移能力。