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目的探讨新型降糖药达格列净抑制乳腺癌细胞增殖的作用机制,从而为达格列净应用于乳腺癌合并糖尿病患者的治疗提供更充分的实验依据。方法1.通过TCGA数据库分析和免疫组化染色,观察人乳腺癌组织与癌旁组织中钠-葡萄糖协同转运蛋白2(Sodium dependent glucose transporters 2,SGLT2)的表达情况。2.采用基因芯片技术对比观察经达格列净处理后,人乳腺癌MCF-7细胞系基因表达变化,并用qRT-PCR和蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)筛选达格列净的可能作用靶点。3.应用流式细胞技术观察达格列净对MCF-7及MDA-MB-231细胞周期的影响;利用WB检测经达格列净处理后,细胞周期相关蛋白和P38-丝裂原活化蛋白激酶(P38-Mitogen Activated Protein Kinase,P38-MAPK)信号通路相关蛋白表达水平的改变。4.利用细胞转染技术下调或过表达MCF-7及MDA-MB-231细胞系中切除修复交叉互补啮齿动物修复缺陷,互补组6样(Excision repair cross-complementing rodent repair deficiency,complementation group6-like,ERCC6L)基因表达水平,并用WB检测细胞周期相关蛋白和P38-MAPK信号通路相关蛋白的表达变化。结果1.TCGA数据库分析和免疫组化染色结果提示:人乳腺癌组织与癌旁组织中SGLT2表达水平无明显差异。2.基因芯片分析结果表明:经达格列净处理后,MCF-7细胞中差异性表达基因主要富集在细胞周期相关事件中;qRT-PCR和WB结果提示:达格列净能显著抑制MCF-7和MDA-MB-231细胞中ERCC6L的表达。3.流式细胞术和WB结果表明:达格列净处理乳腺癌细胞后,处于G1期的细胞增多,而S期和G2细胞减少,且Cyclin D1、Cyclin E1、p-P38和FOS等蛋白质表达下调,DUSP1的表达升高。4.通过下调乳腺癌细胞中ERCC6L的表达,可使Cyclin D1、Cyclin E1、p-P38和FOS等蛋白质表达下降,DUSP1的表达升高。过表达乳腺癌细胞中ERCC6L的表达后,与NC组相比,ERCC6L过表达组ERCC6L蛋白质表达水平上调,ERCC6L和达格列净共同处理组ERCC6L蛋白质表达水平明显下降。结论达格列净通过抑制ERCC6L的表达,阻断DUSP1-P38-MAPK-FOS信号通路,从而诱导乳腺癌细胞周期阻滞并抑制其增殖。