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目的本文主要研究婴幼儿人巨细胞病毒（HCMV）临床分离株包膜糖蛋白H（gH）的基因多态性，分析该基因不同型别在HCMV感染引起的不同疾病中的分布情况及其与不同疾病之间的关系，为进一步了解HCMV致病机理及亚单位疫苗研究提供参考。方法1、HCMV临床分离株的分离培养：取患儿尿液标本接种于人胚肺细胞孵育8-12小时后换液，连续培养至细胞发生病变（CPE），再取上清液接种于新鲜人胚肺成纤维细胞培养至CPE达80%-90%病变时收集和保存。2、gH基因分型：应用巢式PCR扩增HCMV临床分离株和AD169株gH基因，核苷酸纯化试剂盒纯化PCR产物，用限制性内切酶HhaI酶切，酶切片段经12%聚丙烯酰胺凝胶电泳，银染显色，比对分型。3、gH基因序列多态性分析：将部分PCR扩增阳性的产物纯化后测序，与AD169株、Towne株序列进行比对，用DNAsis软件分析。结果1、HCMV临床分离株的分离培养：共选择105例样本进行分离，最终CPE阳性病毒株50株，分离成功率为47.6%。2、gH基因分型：经巢式PCR扩增，50例临床分离株中有34例（14例为婴儿肝炎综合征，12例为无黄疸型肝炎，5例为肺炎，1例为先天性CMV感染）gH基因阳性，阳性率为68%；分型显示，gH1型21株，占61.8%；gH2型13株，占38.2%；未见混合型和发现新的型别，gH基因型别在不同疾病间呈散在分布(X2=0.336,P>0.05)。3、gH基因序列多态性分析：随机挑选15株gH基因阳性标本测序分型并与AD169和Towne株序列比对，gH1型有10株，gH2型有5株，其结果与酶切分型结果完全符合。其中所选的第2、4、5、6、7、9、10、11临床株碱基序列相同，编码的氨基酸也相同，同源性为100%，与AD169株核苷酸相似性、氨基酸一致性分别为97.2%、95.52%，同源性较高；第8、12、14临床株碱基序列、氨基酸相同，相互间同源性也高达100%，与TOWNE株核苷酸相似性为99.53%，氨基酸一致性为95.52%。gH序列变异以核苷酸替换为主，也可见插入和缺失突变；与AD169株相比，核苷酸相似性为89.1%～97.2%，氨基酸一致性为74.24%～95.52%；与TOWNE株相比核苷酸相似性为91.12%～99.53%，氨基酸一致性为80.06%～98.5%。DNA变异位点分布比较散在；氨基酸变异相对集中，与AD169相比，氨基酸变异集中在41～87位点，与TOWNE株比对则集中于33～74位点。结论1、婴幼儿HCMV临床分离株gH基因型别以gH1为主，gH基因型别在婴儿肝炎综合征、无黄疸型肝炎、肺炎疾病中的分布未见明显差异。2、不同HCMV临床分离株gH基因相对保守但仍存在一定的多态性。3、未发现HCMV gH基因多态性与不同临床疾病的关联性。