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目的:对胶质细胞源性神经营养因子(Glial Cell Line-derived Neurotrophic Factor,GDNF)及其受体胶质细胞源性神经营养因子家族受体α1(Glial Cell line-derived Neurotrophic Factor Receptorα1,GFRα1)两种因子在小鼠精原干细胞(Spermatogonial Stem Cells, SSCs)体外培养建系过程中的作用进行探讨。 方法: 1、选取鼠龄为出生后第8日、第2周、第3周,C57 GFP雄性小鼠,取出睾丸,制备SSCs悬液。 2、利用免疫磁珠磁力分选技术(Magnetic-Activated Cell Sorting,MACS)来实现对SSCs的分选、纯化。 3、将分选出的SSCs在含有GDNF和GFRα1的 SSCs培养液中培养,浓度分别为A组:GDNF20ng/ml、GFRα1150ng/ml和B组:GDNF40ng/ml、GFRα1300ng/ml。 4、每周对不同周龄小鼠来源,添加不同浓度GDNF和GFRα1的每种细胞,选取在荧光显微镜下有绿色荧光的细胞拍照,并做数据统计,以此来分析不同浓度GDNF和GFRα1对小鼠SSCs生长情况的影响。 结果: 1、B组:40ng/ml GDNF、300ng/ml GFRα1培养条件下,小鼠SSCs细胞形态结果优于A组:20ng/ml GDNF、150ng/ml GFRα1培养条件; 2、B组:40ng/ml GDNF、300ng/ml GFRα1培养条件下,小鼠SSCs生长曲线结果优于A组:20ng/ml GDNF、150ng/ml GFRα1培养条件。 结论:根据不同周龄(第1-3周)小鼠的SSCs在20ng/ml GDNF、150ng/ml GFRα1和40ng/ml GDNF、300ng/ml GFRα1两种不同培养条件下,从第1周到第8周的培养观察结果,针对于C57品系的第1-3周龄小鼠,40ng/ml GDNF和300ng/ml GFRα1的浓度更利于SSCs的分裂增殖。