等离子体体外抑制白假丝酵母菌生长的实验研究

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目的研究低温等离子体(cold atmospheric plasmas, CAPs)的照射对体外培养白假丝酵母菌(Candida albicans)生长的影响,探索低温等离子体对白假丝酵母菌感染患者进行治疗的可能性,为临床上治疗白假丝酵母菌感染寻找一种新的、安全的治疗方式,在治疗白假丝酵母菌感染的工作中,提供一个新的思路和治疗方案。方法选择白假丝酵母菌标准菌株ATCC10231作为实验菌株,将标准白假丝酵母菌菌株连续三次转种、培养,然后选取适量的白假丝酵母菌菌落经过无菌研磨、稀释,最终配制成浓度为1 ×108和1×107CFU/ml的两组白假丝酵母菌悬液。然后分别取两组浓度的白假丝酵母菌菌液1 00μ1均匀涂布在沙堡琼脂培养基平皿上,将平皿常温放置于无菌操作台中静置30分钟。为了保证实验结果的准确性和随机性,两个浓度组每组随机选择各15块受试平皿,每个照射时问点上同时用3块受试平皿进行平行实验,即在相同实验条件下同时进行实验。在氩气和氧气反应环境下,以介质阻挡放电方法(dielectric barrier discharge, DBD)产生低温等离子体,然后用低温等离子体对受试平皿上白假丝酵母菌菌落进行不同时间的照射。将经过照射的培养基平皿放置于37℃恒温培养箱培养,连续3天观察照射后的培养皿上白假丝酵母菌培养菌落的生长情况,以此来判断低温等离子体照射对沙堡琼脂培养皿上白假丝酵母菌的生长有无影响,以及两个浓度组和不同照射时间下的实验组之间的差异。结果经低温等离子体分别照射0s,30s,60s,120s和180s后的受试平皿,将其放置于37℃恒温培养箱培养24h后,除空白实验平皿外,在均匀生长白假丝酵母菌菌落的培养皿中心经低温等离子体照射位置处,均出现明显的抑菌圈,随着照射时间的延长,抑菌圈逐渐增大;连续观察3天,所有实验组平皿上产生的抑菌圈大小均没有发生改变。抑菌圈大小与白假丝酵母菌菌液浓度呈负相关性,即相同低温等离子体照射时间下,白假丝酵母菌菌液浓度越低,在平皿上产生的抑菌圈越大;同时与低温等离子体照射时间呈正相关性,即相同浓度的白假丝酵母菌菌液平皿,低温等离子体对其照射时间越长,在平皿上产生的抑菌圈越大。结论低温等离子体在体外可明显抑制白假丝酵母菌的生长,而且抑菌现象可以维持较长的时间,为其将来可能成为治疗白假丝酵母菌感染的一种新的、安全的、经济的、可靠的治疗手段提供了新的实验室依据。
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