常用烤瓷合金对细胞凋亡信号分子基因表达与蛋白表达的影响

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目的:研究镍铬,钴铬,纯钛,钯基,金铂5种常用烤瓷合金对小鼠肺成纤维细胞(L929)细胞凋亡信号分子基因表达水平与蛋白表达水平的影响。方法:(1)镍铬,钴铬,纯钛,钯基,金铂5种烤瓷合金分别经过1次熔铸,获得片状试件并分别使用DMEM细胞培养液进行浸提72小时后获得上述5种烤瓷合金试件的浸提液;(2)Real-time qPCR检测上述5种烤瓷合金浸提液培养L929细胞48小时后各合金组以及阴性对照组细胞胞质中Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、细胞色素C、Bax,Bcl-2、Fas、Fasl等信号分子的mRNA表达水平的变化;(3)Western blot检测上述5种烤瓷合金测试试件的浸提液培养L929细胞48小时后各合金组以及阴性对照组细胞胞质中Caspase-3和Caspase-9蛋白表达水平的变化。结果:(1)经过Real-time qPCR检测发现:金铂合金组和钯基合金组Bcl-2的mRNA的相对表达量大于阴性对照组(P<0.05);镍铬合金组Bax的mRNA相对表达量大于阴性对照组(P<0.05);镍铬合金组与纯钛合金组Caspase-9和Caspase-3的mRNA的相对表达量大于阴性对照组(P<0.05);5种烤瓷合金组Caspase-8的mRNA相对表达量均小于阴性对照组(P<0.05);金铂合金组细胞色素C的mRNA相对表达量小于阴性对照组(P<0.05);其他4个合金组细胞色素C的mRNA相对表达量均大于阴性对照组(P<0.05);镍铬合金组、钯基合金组、金铂合金组和钴铬合金组Fas的mRNA相对表达量大于阴性对照组(P<0.05);镍铬合金组、钯基合金组和钴铬合金组Fasl的mRNA相对表达量大于阴性对照组(P<0.05)。(2)经过Western blot检测发现:5种烤瓷合金组的Caspase-9蛋白的表达均高于阴性对照组(P<0.05);金铂合金组、钯基合金组、纯钛合金组以及钴铬合金组的L929细胞胞质中Caspase-3蛋白的表达高于阴性对照组(P<0.05);镍铬合金组的L929细胞胞质中Caspase-3蛋白的表达低于阴性对照组(P<0.05)。结论:(1)不同烤瓷合金在细胞培养液中析出的不同离子将会对细胞凋亡相关信号分子的mRNA和蛋白表达产生不同程度的影响;(2)镍铬、钴铬、纯钛、钯基和金铂等5种常用烤瓷合金可能不通过外源性信号转导途径诱导细胞凋亡;(3)镍铬、钴铬、纯钛、钯基和金铂等5种常用烤瓷合金可能通过内源性信号转导途径诱导细胞凋亡;(4)金铂合金和钯基合金可能通过Bcl-2信号分子对其他促凋亡信号分子的抑制作用来阻止细胞凋亡的发生。
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