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目的研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(N-acetyl-seryl-aspartyl-lysylproline,Ac-SDKP)对巨噬细胞活化的调控在矽肺纤维化中的作用。方法1采用HPOE-ED8050动式染尘系统构建矽肺大鼠模型。SPF级Wistar雄性大鼠70只,每组10只,随机进行实验分组。1)观察矽肺纤维化发生过程中巨噬细胞的活化情况。实验分为(1)对照4周、16周组:常规喂养至4周(Control 4 w,C4W)、16周(Control 16 w,C16W)处死动物;(2)染尘4周、16周组:分别染尘至4周(Sicosis 4 w,S4W)、16周(Sicosis 16 w,S16W)处死动物;2)探讨AcSDKP对巨噬细胞活化的调控作用。实验分为(1)对照组:常规喂养至16周,腹腔内埋入含有生理盐水的微量缓释胶囊,喂养至24周处死(Control 24 w,C24w);(2)染尘组:染尘至16周时,腹腔内埋入含有生理盐水的微量缓释胶囊,喂养至24周处死(Sicosis 24 w,S24);(3)Ac-SDKP干预组:染尘至16周时,在大鼠腹腔内埋入含有Ac-SDKP(800μg/kg/d)的微量缓释胶囊,喂养至24周处死(Ac-SDKP intervention,Ac-SDKP)。2培养小鼠源性细胞系小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)。采用二氧化硅(silicon dioxide,Si O2)诱导RAW264.7细胞,实验分组为(1)对照组(Control);(2)Si O2诱导组(Si O2);(3)Ac-SDKP处理组(AcSDKP+Si O2)。采用免疫组织化学染色法、免疫荧光法检测煤矽肺患者肺组织和大鼠矽肺模型肺组织中I型巨噬细胞标记物(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、Ⅱ型巨噬细胞标记物(Arginase-1,Arg-1)的定位。Western blot法检测I型胶原(collagen type I,COLI)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、iNOS、Arg-1、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)蛋白在大鼠肺组织与RAW264.7细胞中的表达变化。结果1人体煤矽肺尸检标本观察显示,煤矽肺发生发展有一个动态演变的过程,即巨噬细胞性肺泡炎、细胞性矽结节、细胞纤维性矽结节和纤维性矽结节。免疫组织化学染色结果显示,在人体煤矽肺组织标本的细胞性和细胞纤维性矽结节内,有大量煤尘沉积,分别可见CD68、Arg-1标记的阳性细胞分布与表达,iNOS阳性表达缺如。2大鼠肺组织标本对照组中偶见iNOS、Arg-1阳性细胞表达,染尘4周组的大鼠肺组织中可见较多iNOS阳性细胞表达,和较少量Arg-1阳性细胞表达,染尘16周组的大鼠肺组织的矽结节内可见较多Arg-1阳性细胞表达,少量iNOS阳性细胞表达,在结节周围肺泡腔内可见iNOS阳性细胞分布与表达;3免疫荧光结果显示,矽肺模型4周组有较多iNOS标记阳性的巨噬细胞表达,而染尘16周组肺组织中有较多Arg-1阳性标记的巨噬细胞表达;Western blot结果显示,与相应对照组比较,染尘4周组、染尘16周组大鼠肺组织中iNOS、Arg-1蛋白表达均上调;其中染尘16周组iNOS表达较染尘4周组有所下降,染尘16周组Arg-1表达较染尘4周组有所上升。4与染尘24周组比较,给予Ac-SDKP干预后MCP-1、iNOS、Arg-1、α-SMA和COLI表达均下调,差异有统计学意义(P<0.05)。5与对照组比较,Si O2诱导RAW264.7细胞MCP-1、iNOS和Arg-1表达水平上调;与Si O2诱导组比较,Ac-SDKP干预组MCP-1、iNOS和Arg-1表达水平均下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1矽肺纤维化的形成伴随有巨噬细胞活化和不同表型的改变。2 Ac-SDKP可能通过对巨噬细胞活化的调控,发挥其抑制矽肺纤维化的作用。图10幅;表5个;参151篇。