基质金属蛋白酶-14(MMP-14)与结直肠癌相关性研究

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目的研究结直肠癌组织中基质金属蛋白酶-14基因及蛋白的表达并探讨其临床意义。方法(1)实时荧光定量PCR方法检测24例新鲜结直肠癌癌及癌旁冰冻组织中MMP-14基因的表达水平;(2) Western blot方法检测8例新鲜结直肠癌和癌旁组织中MMP-14蛋白的表达;收集90例结直肠癌和配对的30例癌旁组织石蜡包埋标本,免疫组织化学法检测MMP-14蛋白的表达,分析MMP-14蛋白在结直肠癌和癌旁组织中表达的差异及其与临床病理参数的关系;(3)对结直肠癌术后患者进行随访,随访结果应用Kaplan-Meier法分析结直肠癌患者生存率,以及logrank单因素和Cox比例风险回归模型分析MMP-14与结直肠癌预后的关系。结果(1)实时荧光定量PCR显示,MMP-14基因在结直肠癌组织中的相对表达量1.4385(0.0048-7.3106)均高于癌旁组织0.1035(0.0012-5.1337),差异有统计学意义(P=0.0088);琼脂糖凝胶电泳显示MMP-14的PCR产物大小与预先设计一致;MMP-14基因的表达强度与结直肠癌的肿瘤组织浸润深度(P=0.04)、Dukes分期(P=0.03)有显著相关性,而与患者的年龄、性别、分化程度无明显相关性(P值均>0.05)。(2)免疫组化及Western Blot分析显示,MMP-14在结直肠癌组织中的表达明显高于对应的癌旁组织,MMP-14蛋白的表达强度与结直肠癌的淋巴转移(P=0.042)、肿瘤浸润深度(P=0.021)、Dukes分期(P=0.018)有显著相关性。(3)Kaplan-Meier分析显示MMP-14高表达与结直肠癌患者总生存率的降低显著相关。单因素分析表明肿瘤的分化程度、是否伴有淋巴结转移、浸润深度、Dukes分期及MMP-14表达水平这5个病理参数与结直肠癌患者术后生存期长短均有相关性(P <0.05);经Cox比例风险回归模型分析显示MMP-14可作为结直肠癌预后的独立指标(P<0.05)。结论(1)MMP-14基因及蛋白在结直肠癌组织中表达水平均高于癌旁组织,提示MMP-14可能与结直肠癌的发生,发展密切相关;(2)MMP-14的表达与结直肠癌肿瘤患者的淋巴转移、浸润深度和Dukes分期有关,并可作为结直肠癌患者独立预后指标。
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