脑发育和脑功能相关基因的鉴定及功能分析

来源 :中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院生物化学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:marinehope
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神经钙粘着蛋白(N-cakherin)在神经系统的早期形态发生及神经元的分化过程中起重 要作用.为了考究神经钙粘着蛋白在神经元分化过程中可能存在的生物学功能,研究者选择了PA诱导的P19胚胎性癌细胞体外神经分化系统来对此进行研究.同时,通过研究神经发育 早期相关基因如Oct-3,Nestin,BMP4,Mash-1,Notch-1,Wnt-1等在过量表达神经钙粘着 蛋白P19细胞体外神经分化过程中的表达模式,研究者发现神经钙粘着蛋白可能是通过Wnt信号通路来引发P19细胞的体外自发神经分化.为筛选、鉴定神经系统功能新基因,研究者构 建了成年大鼠脑低丰度表达基因cDNA亚库(含10000个丰度表达克隆,可覆盖原cDNA文库的10i).部分克隆的随机测序和序列分析表明,该亚库具有:包含的克隆重组率高,且代表着低或极低丰度表达的基因;在差异筛选中,可排除大量高表达基因所带来的干扰;不必通过其它方法,可直接从该亚库中得到所需基因等优点.利用原位杂交技术,研究者考究了N4基因在大鼠脑内的表达.结合大鼠的学习记忆行为学检测模型(条件性环境恐惧--步下法),研究者得到了大鼠海观中差异表达的突触相关蛋白SNAP-25b基因.通过反义核酸技术,研究者发现:脑室注射该基因反义核酸的大鼠,其环境记忆的形成与保持受到削弱;Northern Blot 和原位杂交结果显示,SNAP-25基因mRNA的表达也下调.以上结果表明,SNAP-25基因以参与了大鼠海马学习记忆的形成过程,并在其中起重要作用.
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