背景高血压和动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)是危害人类健康的两大杀手,在我国心脑血管病发生和死亡者中,一半以上与高血压有关,而AS是冠心病、缺血性脑卒中、外周血管疾病等心脑血管疾病的病理基础。血管内皮功能不全和肾素-血管紧张素-醛固酮系统(renin-angiotensin-aldosterone system, RAAS)过度激活是两者的共同发病机制。血管内皮功能不全与高血压密切相关,参与其发生、发展和转归。同时,它是AS发生的始动环节,贯穿于整个心脑血管事件链中。因此,逆转血管内皮不全功能对防治高血压和AS有着重大临床价值。近年来研究发现肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor, HGF)及其特异性受体即间质-上皮转化因子(mesenchymal-epithelial transition factor, Met)在保护血管内皮功能方面有重要作用,增加血管局部HGF/Met系统表达可能是逆转血管内皮功能不全的一个新的治疗靶点。过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptorγ, PPARγ)是一类由配体激活的核转录因子,激动PPARγ能增加HGF表达、保护血管内皮功能。RAAS过度激活是高血压和AS发病的经典机制,并且它本身就能引起血管内皮功能不全,血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(angiotensinⅡtype 1 receptor blocker, ARB)已广泛应用于高血压、冠心病的治疗,大大改善了患者的预后。替米沙坦是一新型的ARB,因其独特的分子结构使其能选择性激动PPARγ,并且能保护血管内皮功能,且此作用可能独立于降压益处之外。但替米沙坦是否能降低血HGF水平和增加血管局部HGF、Met的表达?其保护血管内皮功能的机制是否与直接激动HGF/Met系统有关?相关文献未见报道。本研究首先观察复方替米沙坦对高血压患者血管内皮功能和血HGF的影响,然后研究替米沙坦对AS模型兔血管内皮功能和主动脉HGF、Met、PPARγ表达的影响,最后探讨它对AngⅡ所致兔胸主动脉内皮功能损伤的影响及其机制是否与直接激动HGF/Met系统和(或)PPARγ途径有关。从而为逆转血管内皮功能不全、防治高血压和AS提供新的治疗靶点,同时也为进一步开发治疗药物提供新的思路。目的观察复方替米沙坦对高血压患者血管内皮功能和血HGF的影响,研究替米沙坦对AS模型兔血管内皮功能和主动脉HGF、Met、PPARγ表达的影响,探讨它对AngⅡ所致兔胸主动脉内皮功能损伤的影响及其机制是否与直接激动HGF/Met系统和(或)PPARγ途径有关。方法(1)66例高血压患者随机分为复方替米沙坦组(T组)和复方氯沙坦组(L组),疗程为8周。分别统计治疗后2周、4周、8周的血压控制率来评价其降压疗效;分别采用双抗体夹心法、免疫比浊法、化学法和放射免疫法测定高血压患者治疗8周前后血清HGF、血浆血管性血友病因子(vWF)、血清一氧化氮(NO)和血浆内皮素(ET)水平,并且与20例健康者(正常对照组)比较。(2)27只4月龄雄性新西兰大白兔随机分为正常组、AS模型组和替米沙坦组,分别给予常规饲料喂养、高脂饲料喂养和高脂饲料喂养加替米沙坦(10mg/kg/d)治疗12周。12周后收集血清检测血脂水平,颈动脉插管测定动脉血压,经皮超声法检测腹主动脉血管内皮功能,动脉环张力离体器官测定法测定离体胸主动脉环内皮依赖性舒张功能,HE染色和透射电镜观察主动脉形态学改变,免疫组织化学法和Westernblot检测主动脉HGF、Met、PPARγ的表达。(3)制备新西兰大白兔离体胸主动脉环,将动脉环分别与溶媒、AngⅡ(0.01μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L)、替米沙坦(0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L)+AngⅡ(1μmol/L)、SU11274(5μmol/L)+替米沙坦(10μmol/L)+AngⅡ(1μmol/L)、GW9662(10μmol/L)+替米沙坦(10μmol/L)+AngⅡ(1μmol/L)、SU11274(5μmol/L)+GW9662(10μmol/L)+替米沙坦(10μmol/L)+AngⅡ(1μmol/L)体外孵育6小时后,采用动脉环张力离体器官测定法分别测定各组动脉环乙酰胆碱(Ach)诱导的内皮依赖性舒张反应和硝普钠(SNP)诱导的非内皮依赖性舒张反应。结果(1)治疗8周后两组收缩压(SBP)、舒张压(DBP)均明显下降(P均<0.01),两组间血压控制率无显著性差别(P均>0.05);与正常对照者相比高血压患者血清HGF、血浆vWF、血浆ET和ET/NO比值明显增高、血清NO明显降低(P均<0.01);治疗8周后两组血清HGF、血浆vWF、血浆ET和ET/NO比值明显下降,血清NO明显升高(P均<0.01),两组血清HGF下降幅度值(△HGF)和血清NO升高幅度值(△NO)无显著性差别(P均>0.05),而血浆vWF降低幅度值(△vWF)、血浆ET下降幅度值(△ET)和△ET/△NO比值T组明显高于L组(P均<0.01);Spearman相关分析显示:除了L组△vWF与△SBP呈正相关(P<0.01)外,其他血管内皮功能指标变化幅度与降低幅度无相关性。(2)12周高脂饲料喂养成功复制出兔AS模型;与正常组相比,AS模型兔血管内皮功能明显受损(P均<0.01),主动脉HGF、Met和PPARγ表达明显降低(P均<0.01);与AS模型组相比,替米沙坦明显改善AS模型兔血管内皮功能不全、体重和血脂(P均<0.01),明显减轻AS进展,明显增加主动脉HGF、Met和PPARγ的表达(P均<0.01)。(3)胸动脉环与AngⅡ(0.01μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L)共育6h,Ach诱导的内皮依赖性舒张反应明显受损,并且呈剂量依赖性,以1μmol/L的AngⅡ抑制效果最为显著(P均<0.01),SNP诱导的非内皮依赖性舒张反应无明显差别(P均>0 05);替米沙坦(0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L)明显逆转1μmol/L AngⅡ导致的动脉环Ach诱导的内皮依赖性舒张反应受损,并且呈剂量依赖性,以10μmol/L替米沙坦逆转效果最为显著(P均<0.01);5μmol/L SU11274和10μmol/LGW9662均部分取消了10μmol/L替米沙坦对1μmol/L AngⅡ损伤动脉环内皮依赖性舒张反应的保护作用(P均<0.01);与10μmol/L GW9662相比,5μmol/L SU11274的作用可能更为明显(P<0.05)。结论(1)复方替米沙坦能有效控制高血压患者的血压、保护血管内皮功能和降低血HGF水平,其保护血管内皮功能作用独立于降压之外,和复方氯沙坦相比,在降压效果相似的情况下,复方替米沙坦能更大程度降低血vWF和ET水平,提示可能更好地保护血管内皮功能。(2)AS模型兔血管内皮依赖性舒张功能明显受损,主动脉HGF、Met和PPARγ表达明显降低;替米沙坦独立于降压之外地保护AS模型兔的血管内皮功能、改善血脂代谢和抑制AS进展,增加主动脉HGF、Met和PPARγ的表达。(3)AngⅡ呈剂量依赖性地损伤兔胸主动脉环的内皮依赖性舒张功能,对其非内皮依赖性舒张功能无明显影响;替米沙坦呈剂量依赖性地逆转由AngⅡ所损伤兔胸主动脉环的内皮依赖性舒张功能,其机制可能与其直接激动HGF/Met系统和选择性激动PPARγ途径有关,尤其是前者。