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研究的背景和目的: 目前舌鳞状细胞癌在口腔癌中的发病率最高，不断寻找新的安全有效的抗肿瘤药物具有重要的意义，近年来中草药中的抗肿瘤药物成为了研究的热点。穿心莲(Andrographis paniculate Ness)是一种爵科植物，现已有许多国家在研究使用。研究发现穿心莲中的穿心莲内酯（Andrographolide，AD）不但有抗炎、抗菌、抗病毒作用，还有较强的抗肿瘤作用。目前AD还未用于舌鳞癌的研究，做此研究有积极的现实意义。本研究目的在于检测AD对人舌鳞癌Tca8113细胞的增殖、细胞周期和BaxmRNA、Bcl-2mRNA表达的影响，从凋亡基因Bax、Bcl-2mRNA的表达情况来探讨AD可能的作用机制，为AD可能成为临床上治疗舌鳞癌的新药物提供了一定依据。 研究内容和方法: 1.人舌鳞癌Tca8113细胞在常规条件下培养，取对数生长期的细胞用于实验。 2.分别加入浓度为0μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、160μg/ml的AD作用于Tca8113细胞，分别继续培养24h和48h后，用MTT法检测AD对细胞生长增殖的抑制作用。 3.分别加入浓度为0μg/ml、20μg/ml、40μg/ml的AD作用于Tca8113细胞，分别继续培养24h和48h后，用流式细胞仪分析AD对细胞周期的影响。 4.分别加入浓度为0μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml的AD作用于Tca8113细胞，继续培养24h后，用RT-PCR法检测AD对人舌鳞癌Tca8113细胞Bax、Bcl-2 mRNA表达的影响。 结果: 1.MTT结果显示，AD作用Tca8113细胞后，能够显著地抑制细胞的增殖;分别加入浓度为0μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、160μg/ml的AD作用Tca8113细胞24h后，细胞的抑制率分别为（0±0）％，（2.37±0.19）％，(11.34±1.01)％，(36.65±1.99)％，（49.61±3.34)％，（72.11±5.01)％;AD作用Tca8113细胞48h后，细胞的抑制率分别为（0±0）％，（11.37±1.01）％，（27.43±1.93）％，(46.08±3.28)％，(65.59±6.33)％，(79.47±7.33)％。Tca8113细胞在AD作用相同的时间里，随着实验剂量范围内AD浓度的增加，细胞的抑制率逐渐升高(P＜0.05);而同一AD浓度组的细胞被AD作用48h的抑制率比作用24h的抑制率高(P＜0.05)，具有明显的剂量-时间依赖性。利用SPSS软件计算出舌鳞癌细胞被AD作用24h后的IC50值为74.66μg/ml。 2.流式细胞术(FCM)结果显示，浓度分别为0μg/ml、20μg/ml、40μg/ml的AD作用于Tca8113细胞24h后，细胞周期中的G0/G1期细胞比例分别为（39.45±0.56）％，（49.10±0.81）％，（56.61±0.64）％，S期细胞比例分别为（56.55±0.53）％，（46.57±0.60）％，（36.86±0.73）％。不同浓度的AD作用Tca8113细胞48h后，细胞周期中的G0/G1期细胞比例分别为（40.16±1.03）％，（57.34±0.65）％，（63.70±0.65）％，S期细胞比例分别为(58.31±0.75)％，（37.23±0.76）％，(32.28±0.54)％。Tca8113细胞在AD作用相同的时间内，随着AD浓度的增加，G0/G1期细胞分布比例升高(P＜0.01)，S期的细胞降低(P＜0.01);细胞在相同浓度AD的作用下，随着作用时间延长，G0/G1期的细胞分布比例升高(P＜0.01)，而S期的细胞分布比例降低(P≤0.01);对照组（0μg/ml）细胞在培养24h与48h后，舌鳞癌细胞周期的分布变化不大，(P＞0.05)。 3.RT-PCR检测结果显示，AD浓度分别为0μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml作用于Tca8113细胞24h后，BaxmRNA的表达量分别为0.383±0.013，0.513±0.021，0.631±0.036，0.733±0.042，0.916±0.048;Bcl-2mRNA的表达量分别为1.137±0.016，0.913±0.025，0.570±0.030，0.403±0.032，0.333±0.025。AD能够促进细胞中BaxmRNA表达，抑制Bcl-2mRNA表达（P＜0.05），并具有剂量依赖性。 结论: 穿心莲内酯(AD)对人舌鳞癌Tca8113细胞的增殖有明显的抑制作用，能够显著的阻滞细胞周期于G0/G1期，并且能促进细胞株BaxmRNA表达和抑制Bcl-2mRNA表达，从而诱导细胞凋亡，为AD可能成为临床上治疗舌鳞癌的新药物提供了一定的实验依据。