本文从以下两部分进行了阐述：　　第一部分 在口腔鳞癌细胞系中基因Y高表达及敲降稳转细胞系的建立及其对生物学表型的影响　　目的:　　通过在口腔鳞癌细胞中实现基因Y的表达改变，研究基因Y对该细胞增殖、迁移等生物学行为的影响，从而探索基因Y在口腔鳞状细胞癌发生发展过程中的作用，为探索其分子机制和寻找肿瘤标志物提供线索和方向。　　方法:　　1.高表达和敲降基因Y的慢病毒颗粒转染口腔鳞癌细胞（scc-25细胞），经嘌呤霉素(puro)筛选后建立该细胞的稳转细胞系;采用qPCR实验及Western Blot实验验证该稳转细胞系中基因Y在mRNA及蛋白水平的表达变化情况。　　2.采用实时无标记细胞功能分析仪进行生长曲线的测定，检测基因Y对细胞增殖能力的影响;采用transwell实验检测基因Y对细胞迁移及侵袭能力的影响;采用克隆形成实验检测基因Y对细胞增殖能力的影响;采用流式细胞术检测基因Y对细胞的细胞周期分布情况的影响。　　3.采用裸鼠皮下成瘤实验，检测基因Y对裸鼠皮下瘤体生长情况的影响。　　结果:　　1.经qPCR实验及Western Blot实验验证，基因Y在该细胞中的mRNA及蛋白水平均有明显的升高与降低，说明口腔鳞癌的基因Y高表达及敲降稳定转染细胞系建立成功。　　2.细胞生长实验表明，高表达基因Y能够促进口腔鳞癌细胞生长速度，敲降基因Y能够抑制口腔鳞癌细胞的生长速度。　　3.克隆形成实验表明，高表达基因Y能够促进口腔鳞癌细胞增殖能力，敲降基因Y能够抑制口腔鳞癌细胞的增殖能力。　　4.Transwell实验表明，高表达基因Y能够促进口腔鳞癌细胞迁移、侵袭能力，敲降基因Y能够抑制口腔鳞癌细胞的迁移、侵袭能力。　　5.流式细胞术结果表明，高表达基因Y能够促进口腔鳞癌细胞有丝分裂活性，影响细胞周期分布;敲降基因Y能够抑制口腔鳞癌细胞有丝分裂活性，影响细胞周期分布。　　6.裸鼠皮下成瘤实验结果表明，敲降基因Y抑制裸鼠皮下成瘤。　　结论:　　1.高表达基因Y影响口腔鳞癌细胞的细胞周期分布情况、增强细胞增殖能力、加快细胞生长速度、促进细胞迁移及侵袭能力。　　2.敲降基因Y影响口腔鳞癌细胞的细胞周期分布情况、减弱细胞增殖能力、减缓细胞生长速度、抑制细胞迁移及侵袭能力。　　第二部分 基因Y对基因U不同剪切体表达的调控及基因U不同剪切体稳转细胞系的构建　　目的:　　通过在口腔鳞癌细胞中实现基因U不同剪切体表达改变，研究基因Y是否调控基因U的不同剪切体表达，以此探究基因Y是否通过调控基因U不同剪切体表达参与肿瘤发生。　　方法:　　1.基因U不同剪切体的慢病毒颗粒转染口腔鳞癌细胞，经嘌呤霉素筛选后建立稳转细胞系。　　2.用qPCR所得产物进行琼脂糖凝胶电泳实验及DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳即DNA-PAGE实验，在紫外灯光观察下找到目的条带，并将其切取下来进行DNA纯化，将纯化回收所得的DNA进行测序、验证。　　结果:　　1.DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳(DNA-PAGE)实验结果表明，基因Y对基因U不同剪切体的表达具有调控作用。　　2.琼脂糖凝胶电泳实验结果表明，基因U不同剪切体U(15+)、U(15-)及NC对照在scc-25细胞中稳转细胞系建立成功。　　结论:　　1.基因Y对基因U不同剪切体的表达具有调控作用，高表达基因Y后，U(15+)表达含量增加，U(15-)表达含量减少;敲降基因Y后，U(15+)表达含量减少，U(15-)表达含量增加。　　2.基因U不同剪切体稳转细胞系建立成功。