【摘 要】
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目的:探究Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)及其磷酸化蛋白(Phospho-Yes-associated protein,p-YAP)在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)和癌旁正常黏
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目的:探究Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)及其磷酸化蛋白(Phospho-Yes-associated protein,p-YAP)在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)和癌旁正常黏膜组织中的表达水平,以及与其临床病理特征之间的关系。探讨YAP蛋白的表达情况与喉鳞状细胞癌患者预后之间的关系。方法:采用实时荧光定量PCR检测YAP基因在30例新鲜LSCC及癌旁正常黏膜组织中mRNA水平的表达情况,以GAPDH为内参基因,采用2-△△CT法分析目的基因;通过Western Blot检测YAP/p-YAP蛋白在30例新鲜LSCC及癌旁正常黏膜组织中的表达水平及各自在核/浆蛋白中的表达情况;通过免疫组化SP法检测136例LSCC及30例癌旁正常黏膜组织的石蜡切片中YAP/p-YAP蛋白的表达,结合患者临床病历资料,分析其差异性表达与喉鳞癌患者的各项临床病理指征之间的关系;随访136例喉鳞癌患者的预后情况,分析YAP表达情况与患者预后的相关性及危险因素。结果:1.实时荧光定量PCR结果显示:在mRNA水平上,YAP基因在LSCC组织中的相对表达量为4.915±4.107,远高于癌旁正常黏膜组织中的相对表达量1.748±1.615,差异具有统计学意义(t=4.931,P<0.05)。2.Western Blot结果显示:在总蛋白、核蛋白中,YAP蛋白在LSCC组织中的相对表达量分别为1.448±0.538、1.248±0.208,均高于癌旁正常黏膜组织的0.166±0.121、0.054±0.022,差异具有统计学意义(P<0.05);而p-YAP蛋白则表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。在浆蛋白中,p-YAP蛋白在癌旁正常黏膜组织中的表达高于LSCC组织,差异具有统计学意义(P<0.05);而YAP蛋白相对表达量的差异则无统计学意义(P>0.05)。3.免疫组化结果显示:YAP蛋白在肿瘤胞浆和胞核中均有表达,而p-YAP蛋白则主要在正常喉黏膜细胞的胞浆中表达,少量表达于胞核中。YAP蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的阳性表达率(76.47%)远远高于癌旁正常黏膜组织(20.00%),差异具有统计学意义(X2=35.062,P<0.05)。YAP蛋白在LSCC组织中的表达差异与临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者年龄、性别、吸烟、饮酒、发病部位及分化程度无关(P>0.05);p-YAP蛋白的表达差异则与临床分期有关(P<0.05),与患者年龄、性别、吸烟、饮酒、发病部位、分化程度及淋巴结转移均无相关性(P>0.05)。4.Kaplan-Meier生存分析结果表明,YAP蛋白的阳性表达与患者生存率有关,阳性表达组患者的3年累计生存率(77.2%)低于未表达组(95.7%),差异具有统计学意义(X2=8.077,P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,YAP蛋白阳性表达和淋巴结转移是影响喉癌预后的独立危险因素。结论:YAP在喉鳞状细胞癌中呈高表达,其蛋白表达与患者的临床分期、淋巴结转移有关,并且同时在总蛋白和核蛋白中呈高表达,表明其可能与喉癌的发生、发展密切相关,同时,YAP蛋白阳性表达和淋巴结转移是影响喉癌预后的独立危险因素,若YAP蛋白呈阳性表达和/或淋巴结转移者,预后则越不理想。而p-YAP蛋白则多表达于正常黏膜组织,其表达与患者的临床分期有关。本研究可为预测喉鳞状细胞癌诊断及治疗的新靶点提供依据。
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