激活素受体相互作用蛋白4的基因克隆及其特性研究

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激活素(Activin)属于转化生长因子-β(TGF-β)超家族的多功能生长和分化因子。新的研究揭示,Activin与其Ⅱ型受体(ActRⅡ)结合后,并非直接激活下游信号传导蛋白Smads,ActRⅡ首先与Smads上游的Activin受体相互作用蛋白(ActRIPs)结合,再通过不同的ActRIP介导的信号传导途径,调控Activin应答的细胞内信号传导过程。本研究在克隆新的激活素受体相互作用蛋白4(ActRIP4)基因基础上,采用哺乳细胞双杂交系统、免疫沉淀技术等确定ActRIP4可与Activin的ⅡA型受体(ActRⅡA)相互作用;通过特异信号传导检测系统发现ActRIP4促进Activin诱导的细胞内信号传导。RT-PCR检测ActRIP4 mRNA组织学表达,结果发现ActRIP4 mRNA在多种组织均有不同程度的表达;另外,RT-PCR检测发现ActRIP2-4 mRNA在小鼠巨噬细胞均有表达,肝细胞表达ActRIP2,4,小鼠骨髓间充质干细胞则表达ActRIP3,4,这种表达差异为阐述ActRIP介导Activin作用组织学特异性的信号传导机制提供了理论依据。在小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞过表达ActRIP4可以促进NO和IL-1β分泌以及iNOS和IL-1βmRNA表达,而基因沉默ActRIP4的效果正相反。采用流式细胞术检测结果发现,过表达ActRIP4可上调ActRⅡA受体的表达。流式细胞术检测细胞表面CD分子,结果发现ActRIP4过表达具有促进小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞向DC样细胞分化的作用。已经发现的ActRIP1,2属于Activin信号传导途经抑制蛋白,ActRIP3属于Activin信号传导途经正向调节蛋白,本研究结果表明ActRIP4作为ActRIPs家族新成员,具有促进Activin诱导的细胞内信号传导作用,为进一步研究ActRIPs介导的Activin信号传导机制提供了新的数据和资料。
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