维生素D包括维生素D2(麦角钙化醇)和D3(胆钙化醇)，但它们不具备生理活性，1α,25(OH)2D3是动物体内多种形式中最主要的活性形式，它是维生素D3首先经肝细胞微粒体和线粒体产生的25-羟化酶作用，生成25-OH-D3，再经肾小管细胞线粒体中经1-α-羟化酶作用，进一步转变成1α,25(OH)2D3，它在生长、繁殖、免疫等方面发挥重要的调控作用。
　　睾丸是雄性哺乳动物的主要生殖器官，其主要功能是分泌激素和产生精子，种公猪的睾丸发育与其终身产精能力密切相关，为研究不同剂量1α,25(OH)2D3对仔猪早期睾丸发育的影响，本研究以1α,25(OH)2D3为研究材料，选取21天断奶公猪140头随机分为四组，即对照组为空白组，试验组为1、2、3组，分别添加剂量为1ug.kg-1、2ug.kg-1、4ug.kg-1，试验周期共计40天。通过对生长性状表型指标检测以及早期睾丸发育的形态和组织学观察，应用蛋白组学iTRAQ/TMT标记技术与生物信息学技术比较分析不同剂量组与对照组差异蛋白表达，以探索其发育生物学进程和调控的代谢途径，为不同形式的维生素D在雄性动物繁殖调控的应用提供理论支持。
　　本研究结果如下：
　　1.通过对保育猪生长指标及睾丸发育性状的测定，结果显示：1α,25(OH)2D3对仔猪的日增重、饲料转化率无显著影响(P＞0.05)；试验组3与对照组和试验组1相比在睾丸重量上差异显著(P＜0.05)，试验组1和试验组2与对照组差异不显著(P＞0.05)；试验组3与对照组、试验组1、试验组2相比在睾丸体积上差异极显著(P＜0.01)，其他组差异不显著(P＞0.05)；试验组3与对照组相比在睾丸体重比上差异显著(P＜0.05)，试验组1和试验组2与对照组差异不显著(P＞0.05)，试验组之间差异不显著(P＞0.05)。
　　2.通过对保育猪睾丸组织形态学观察，结果显示：试验组3与对照组和试验组1相比在生精小管面积上差异极显著(P＜0.01)，试验组1和试验组2与对照组相比差异不显著(P＞0.05)；试验组3与对照组相比在间质细胞数量上差异极显著(P＜0.01)，试验组1和试验组2与对照组相比差异不显著(P＞0.05)，试验组之间差异不显著(P＞0.05)；试验组2和试验组3与对照组和试验组1相比在支持细胞数量上差异显著(P＜0.05)。
　　3.通过利用蛋白组学iTRAQ方法TMT标记技术对添加不同剂量的1α,25(OH)2D3睾丸组织进行差异蛋白分析，结果显示：试验组1与对照组相比共有25个差异蛋白，其中20个蛋白质上调，5个蛋白质下调；试验组2与对照组相比共有62个差异蛋白，其中19个蛋白质上调，43个蛋白质下调；试验组3和对照组相比共有90个差异蛋白，其中66个蛋白质上调，24个蛋白质下调。根据KEGG富集通路和生物信息学分析，发现试验组3在胆固醇侧链裂解酶和芳香化酶3等重要蛋白具有显著的上调作用，对早期睾丸的支持细胞和间质细胞数量具有显著影响。
　　本研究结论为：
　　1.在保育猪日粮中添加4ug.kg-1的1α,25(OH)2D3在其睾丸重量、睾丸体重比方面具有显著上调作用(P＜0.05)，而在睾丸体积方面则具有极显著上调作用(P＜0.01)，对保育猪的日增重与饲料转化率生长性状无显著影响(P＞0.05)。故在仔猪保育阶段的日粮中添加4ug.kg-1对其睾丸的早期发育具有一定的上调作用。
　　2.在保育猪日粮中添加2ug.kg-1的1α,25(OH)2D3在其睾丸组织形态学中支持细胞数量方面具有显著上调作用(P＜0.05)；而添加4ug.kg-1的试验组对早期睾丸的间质细胞数量、生精小管面积上均具有极显著上调作用(P＜0.01)，支持细胞数量有显著上调作用(P＜0.05)。睾丸间质细胞、支持细胞数量以及生精小管面积为公猪性成熟阶段睾丸的发育奠定了重要物质基础。
　　3.蛋白组学差异表达结果显示，4ug.kg-11α,25(OH)2D3与对照组相比，可以显著上调胆固醇侧链裂解酶、芳香化酶3的表达量，从而通过类固醇激素生物合成通路促进睾丸间质细胞、支持细胞增殖；也可以显著上调过氧物酶体生物合成通路中过氧化氢酶的表达量而增强睾丸细胞的抗氧化能力，免受过氧化氢的毒性作用，为仔猪睾丸发育蛋白组学提供了理论依据。