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由于具有成活率高、树干通直、材质优良、抗逆性强等特性,“中涡1号”杨成为我国北方地区栽培的杨树优良品种之一,在林木生产中占有重要的经济地位。但长期的无性繁殖,使得这个品种出现了生理性状退化的现象。本研究以安徽省亳州市涡阳县林业局苗圃基地内扦插繁殖的“中涡1号”杨(Populus Deltides‘Harvord’XP.Deltides‘Lux’)为材料,系统地研究了“中涡1号”杨的多代茎尖培养技术,并在获得组培苗的基础上,应用透射电子显微镜观察比较扦插繁殖苗植株和组培苗植株叶片细胞的超微结构。主要的研究成果如下:
1.以水培得到的“中涡1号”杨茎段为外植体,先用70%的酒精消毒10s,再经0.1%的HgC12消毒4min后接种到培养基中,得到腋芽分化的最佳培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L,分化率60%。
2.初代培养所获得的芽数量较少,需接种到继代增殖培养基中进行扩繁,以获得大量的芽苗。将诱导出的芽苗接种到MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.02mg/L培养基上进行继代增殖培养,增殖系数达到7.5。
3.在继代扩繁的芽苗中剪取0.5cm左右高的茎尖接入到筛选出的最佳激素组合MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.02mg/L中进行培养,间隔20d、30d、40d、50d转接一次。结果表明:继代培养30 d后的茎尖转接入新培养基中芽苗长势旺盛,平均生长高度可达1.6cm。
4.适宜浓度的GA3有利于芽的伸长生长和增殖生长,当GA3浓度为0.3mg/L时,对“中涡1号”杨继代增殖过程中芽的伸长和增殖生长有显著效果。
5.芽苗在最佳生根培养基1/2MS+IBA0.2 mg/ L+NAA0.05 mg/L上,生根率达到90%。
6.生长良好的生根苗经炼苗后移栽到泥炭:蛭石:珍珠岩=3:1:1的基质中,成活率达80%。
7.应用透射电镜对扦插繁殖植株与各代茎尖培养出的植株叶片进行超微结构的观察。镜像结果显示扦插繁殖的植株叶片细胞中叶绿体形状发生变化,结构受到破坏,双层膜破损严重,基粒片层解体;多代茎尖繁殖培养出的植株叶片细胞结构完整,叶绿体数量多,内部片层结构排列整齐,淀粉粒清晰可见。