根据猪繁殖与呼吸综合症病毒美洲型毒株VR-2332株的基因序列,设计了一对GP5基因特异性引物P1/P2,以PRRSVJL/07/SW毒株细胞培养物为模板.利用RT-PCR方法,成功扩增出GP5基因,然后以pMD18-T为载体对GP5基因进行克隆。序列测定结果表明,GP5基因全长603bp,编码201个氨基酸；序列分析表明,GP5基因与VR-2332株和LV株核苷酸同源性分别为91.6%及48.7%,编码氨基酸同源性分别为87.6%及60.0%。将GP5基因亚克隆到pCI-neo表达载体中,构建表达质粒pCI-GP5.将重组质粒转染Marc-145细胞中,用间接免疫荧光试验、SDS-PAGE鉴定目的蛋白的表达。结果表达出约25 KDa融合蛋白,经Western-blot免疫印迹分析,重组蛋白与抗PRRSV的阳性血清发生特异性反应,表明其具有抗原活性。用重组表达的融合GP5蛋白作为包被抗原,经Western-blot分析表明,该重组蛋白可以与PRRSV阳性血清反应并具有良好的反应性,以此纯化的重组蛋白建立了诊断PRRS的间接ELISA方法。实验确定了最佳抗原包被浓度为2.30μg/mL, PRRSV阳性血清稀释度为1：100。用间接ELISA方法检测PRRS与猪的其它常见疾病均无交叉反应,特异性强。本论文研究PRRSV GP5基因的克隆与分析,应用分子生物学技术将PRRSV GP5基因与真核表达载体pCI-neo连接并建立间接ELISA方法,对PRRSV JL/07/SW株的病原分子生物学特点进行研究,并建立了初步的诊断方法。该研究对于PRRS的病原学研究、流行病学调查及诊断防治均具有重要意义。为下一步研究各结构基因的功能及其免疫原性奠定了基础。