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目的 通过对激光处理组与未予以激光处理组的所取切片的I型/III型胶原含量比值的对比分析,探索点阵CO2激光Scaar Fx对兔耳增生性瘢痕中I型/III型胶原比值的影响。 方法 1、参照Morris法制作双侧兔耳腹侧增生性瘢痕模型(图1)。 2、将新西兰标准大白兔分为正常皮肤组(A组),瘢痕对照组(B组),激光治疗组(C组) 3、造模第28天后,C组予以点阵CO2激光治疗(Scaar Fx:能量:60.0mJ,频率:250Hz, Shape:2, Size:10, Pulses:1,Density:5%)(图3)。 4、分别于激光治疗后第3天、7天、14天、21天、28天、2月在瘢痕对照组和激光治疗组均取0.5cm*0.5cm瘢痕全层一条标本,切取范围包括瘢痕全层、下方部分软骨层、周边少许正常组织,中性甲醛液固定。 5、HE染色进行组织学观察,观察真皮层胶原排列走向、血管增生情况。 6、特殊染色:经苦味酸天狼星红染色后,在偏光显微镜可以分辨不同的纤维类型:I型纤维粗大,呈黄色或红色;III型胶原纤维纤细,呈绿色。因此可以在同一张切片上同时显示两者及其相互间的关系。 7、运用图像分析技术求得所取切片上的I型、III型胶原含量,以及I/III型胶原之比,并对其进行统计学分析。 结果 1、HE染色组织学观察:正常皮肤中结构层次清楚,胶原呈鲜红色,排列疏松,规则,排列方向与表皮一致(图4)。瘢痕对照组中可以看见大量的成纤维细胞、炎性细胞、分布紊乱的胶原纤维,以及被过量的胶原纤维挤压变形的血管,血管腔多、且大(图5)。予以激光治疗后的瘢痕组织较对照组,其胶原排列有序,血管数量较少。 2、特殊染色观察:兔耳增生性瘢痕组织经特染后显示主要为粗大的I型胶原。激光治疗后第三天的瘢痕组织经苦味酸天狼星红染色后于真皮乳突区可见新生的III型胶原,创面主要为III型胶原纤维(图14),随时间进展,I型胶原逐渐增多,在激光治疗后的第28天到2月,I/III型胶原比值没有明显的变化。3、图像分析:正常皮肤组(A组)中I/III型胶原含量比为:1.32:1;瘢痕对照组(B组)中的I/III型胶原比值逐渐远远高于正常皮肤组(第3天、7天、14天、21天、28天、2月比值分别为:4.6201±1.1567:1、4.982±1.2721:1、8.2383±1.3601:1、15.6203±3.0364:1、9.3015±2.2693:1、8.7717±1.1122:1。(P<0.001,数值有统计学意义));激光治疗后的瘢痕组织中的I/III型胶原含量比值大大低于增生性瘢痕组织中的比值(第3天、7天、14天、21天、28天、2月比值分别为:0.6151±0.6424:1、0.8817±0.5359:1、1.5233±0.0586:1、1.8517±0.0417:1、1.9433±0.9991:1、2.2067±0.6260:1(P<0.001,数值有统计学意义)),到治疗后2个月时趋近于正常皮肤组(见附表2)。 结论 点阵 CO2激光 Scaar Fx治疗兔耳增生性瘢痕后,可使瘢痕组织中I型/III型胶原比值降低,这可能是点阵CO2激光Scaar Fx治疗增生性瘢痕的机理之一。