论文部分内容阅读
本研究以啤酒中的谷胱甘肽(GSH)和反-2-壬烯醛为检测指标,采用液相色谱的手段,建立两种物质测定的方法;以低产双乙酰啤酒酵母SL为出发菌株,采用甲基磺酸乙酯(EMS)诱变,以氯化锌和甲硫氨酸为筛子筛选高产谷胱甘肽的酵母菌株。主要取得以下研究成果:(1)高效液相色谱检测啤酒中谷胱甘肽的方法是:流动相为磷酸二氢钠溶液(0.6%,pH=3.5):甲醇=96:4(V:V);流动相的pH为3.5;最佳流速是0.8mL/min;谷检测波长是225nm;所用色谱柱为SB-C18;进样体积10μL。该方法在50mg/L-400mg/L线性关系较好,线性相关系数到达0.9988.回收率93.4%-96.3%,RSD%小于2%。同时,与亚硝基铁氰化钠法、DTNB法和四氧嘧啶法相比,该方法的精密度和回收率较高。(2)高效液相色谱法检测啤酒中反-2-壬烯醛的方法是:流动相:甲醇:水=60:40(V/V);流速为1mL/min;色谱柱SB-C18柱(Agilent4.6mm×250mm,5μm);检测波长226nm;进样体积10μL;蒸馏前在啤酒中加入3g氯化钠,收集蒸馏液的体积为20mL;用乙腈洗脱,洗脱速率为2mL/min;该方法线性关系较好,相关系数为0.9971;回收率88.3%-90.0%,RSD%为3.7%。(3)EMS的最佳诱变条件是:EMS的体积分数为45μL/mL,作用时间为30min,在该条件下,其致死率为82.28%。氯化锌及甲硫氨酸的最佳使用浓度分别为0.8g/L、18g/L。在此浓度下,致死率分别为87.86%、89.26%。(4)通过以上条件,筛选出一株发酵性能良好、谷胱甘肽含量高、遗传稳定性好的突变株SL-31。(5)小试试验表明,突变株SL-31与出发菌株SL相比,降糖能力、双乙酰还原能力略强,啤酒各项风味物质含量中乙醛、异戊醇的含量明显降低,乙酸乙酯的含量略有增加,GSH的含量较出发株提高了34.5%,TBA含量降低了29.0%,RSV提高了39.4%。