胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，其死亡率高居诸恶性肿瘤之首，五年生存率低于30％，胃癌的浸润与转移是多数患者致死的直接原因。近年来对胃癌转移分子调控机制的研究，已经成为国内外学者研究的热点。核因子-KappaB(NFκB)是近年来发现的核转录因子，可在转录水平上调控许多基因的表达，其与肿瘤的发生与发展有密切联系。虽然有研究表明，NFκBp65亚单位蛋白在多种肿瘤组织中的表达和活性明显高于周围正常组织或良性病变，但对某些问题的研究结果仍存在分歧，如：NFκBp65与肿瘤分化、淋巴结转移、肿瘤的分期与大小的关系等。而且很少有资料涉及有关NFκB的表达和调节以及它在胃癌的发生发展中的侵袭生物特性方面的问题，NFκBp65亚单位蛋白在肿瘤组织中的研究在国内仅有少许报道。 本课题应用免疫组织化学En Vision二步法，检测胃癌组织与癌旁组织、胃肠化粘膜及正常胃粘膜中NFκBp65亚单位蛋白的表达情况，探讨NFκB在胃癌的发生过程中的作用以及NFκBp65与胃癌临床病理学参数之间的关系，旨在从这一角度预测胃癌前病变患者、胃癌患者的预后，有助于胃癌的早期发现、早期诊断，早期治疗，为制定合理的综合治疗提供理论依据。 材料与方法： 收集浙江大学医学院附属邵逸夫医院以及浙江省青春医院1998-2002年间经手术证实的胃癌和癌旁组织52例以及相应非癌组织40例(胃粘膜肠型化生与正常胃粘膜各20例)。采用En Vision二步法免疫组化染色，检测包埋组 浙江大学硕土学位论文织中的NF。B的表达情况。所用的一抗为：NF。BP65单抗，用DAB显色。实验结果判断，NF。B p65亚单位以细胞浆中出现棕黄色细颗粒状沉淀为阳性表达。按阳性细胞所占百分比，并结合染色强度作适当调整进行半定量分析。统计学处理采用X’检验。 结果与讨论： NF K B p65在胃癌中的表达明显高于癌旁组织印叫刀 1人在正常胃粘膜－胃肠化－胃癌过程中，P65蛋白的阳性表达率逐渐上升，胃癌、胃肠化组织分别与正常胃粘膜的 NF。B p65表达差异存在明显统计学意义0＜0刀1人NF K B p65表达与肿瘤细胞的分化程度有关。在低级别分化胃癌组中，NF。B p65表达明显高于高级别分化组（P＜0刀引。 NF。Bp65蛋白表达与患者的年龄、肿瘤分期无相关性。在有淋巴结转移的胃癌中，NF。即65表达率高于无淋巳结转移的胃癌：在瘤块大于5厘米的肿瘤中，NF。Bp65表达率较小于 5厘米的胃癌为高，但未显示统计学意义，其原因可能与样本数不够有关，假如增加样本数，可能会减少一些统计偏倚。 NF K B属于一个多效性转录调节因子家族，控制着多种基因的表达。NF。B与肿瘤浸润与转移中的一些基因的转录有关，如在细胞粘附、细胞外基质的降解、血管形成等相关的基因中均含有 K B位点，NF K B可以通过对这些基因的调控在肿瘤浸润与转移中发挥作用。当肿瘤细胞中的NF K B活性发生异常时，可以诱导肿瘤的发生与发展。本实验显示，P65蛋白的阳性表达随着细胞恶性 度的增加而呈逐渐上升趋势，说明 NF K B的异常激活在胃癌的发生过程中起一 定的作用，NF。B表达上调可能是胃癌发生中的早期事件，推测NF。B P65是 胃癌相关的一种癌蛋白，在胃癌的发生与发展中发挥重要调节作用。 恶性肿瘤的转移是一个早期即发生的行为，在应用常规病理学检查尚未发 现异常时，在分子生物学水平上己经发生了改变。本实验发现，在部分癌旁组织 中尽管细胞形态学上未观察到异常改变，但当应用免疫组织化学方法检测 NF K Bp65时，则有部分组织显示出了异常反应。说明在癌症浸润与转移的早期己经 出现了 NF K B的高表达，NF K B与癌细胞的浸润和转移的特性有关，研究 NF 。Bp65的表达对诊断早期微转移和估计预后有积极的意义。NF。B p65表达可 以作为对胃癌前病变、胃癌患者跟踪观察的一项检测指标。 2 浙江大学硕士学位论文结论： l、NF。B p65在胃癌中表达是增高的。 2、NF。B P65在胃肠化组织与癌旁组织中的表达与正常胃粘膜相比增高。 3、NF。B p65表达与肿瘤细胞的分化程度呈负相关。 4、NF。B p65与患者的年龄、肿瘤分期、肿瘤大小、有无淋巴结转移无相关性。 5、NF K B p65的检测可作为预测胃癌前病变、胃癌转移的一项客观指标。