【摘 要】
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该试验用克隆出的大鼠rhoa基因构建到质粒pAdTrack-CMV中,获得重组质粒pAd-rhoa,用阳离子脂质法介导转染到神经干细胞,观察目的基因的表达及其对运动神经元和神经干细胞的作
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该试验用克隆出的大鼠rhoa基因构建到质粒pAdTrack-CMV中,获得重组质粒pAd-rhoa,用阳离子脂质法介导转染到神经干细胞,观察目的基因的表达及其对运动神经元和神经干细胞的作用.神经干细胞的培养是取新生大鼠脑组织,机械离散,用bFGF生长培养基培养,成功获得原代干细胞球,经过nestin免疫组化染色为阳性,单细胞克隆培养获得次代细胞球,分化培养出多种神经细胞,说明培养出了神经干细胞.同时借鉴其他学者的方法,构建出脊髓损伤模型,并从损伤脊髓中提出相关的组织液,了解提取液对离体神经元的作用,说明神经干细胞的生长受损伤脊髓提取液的影响不大,不同时段的炎性因子的作用无差别.把构建好的重组质粒PAD-rhoa转染到神经干细胞,用运动神经元计数、透射电镜、MTT比色实验观察运动神经元的存活活性;用台盼蓝排斥试验检测离体神经干细胞的活性,了解了rhoa转染神经干细胞后能有效的表达出目的基因和功能基因,对离体神经元和神经干细胞有保护作用.
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