整体柱是一种具有广阔应用前景的新型色谱固定相,也是目前液相色谱领域研究的一个热点。基于巯基的绿色点击化学反应,具有反应条件温和、产率高等特点,目前已经被广泛应用于聚合物的制备以及材料表面修饰等方面。然而,目前鲜有文献报道点击化学反应直接制备整体柱的研究。本论文针对目前有机整体柱和杂化整体柱中存在的一些问题,本文发展了三种基于点击反应制备整体柱的新技术:1.针对整体柱制备周期长的问题,采用巯基-丙烯酸酯(thiol-acrylate)点击聚合反应快速制备有机整体柱。十八硫醇的引入有效地抑制传统自由基聚合过程中的氧阻聚现象。此反应过程中既包含丙烯酸酯间的自聚反应,又存在丙烯酸酯与巯基间的共聚反应。所制备的有机整体柱对苯系物实现高效分离,最高柱效达75,000 N/m。对四种标准混合蛋白酶解液的分离效果与C-18填充柱结果相当。并且结合液质联用(cLC-MS)技术首次将毛细管整体柱应用于长柄扁桃蛋白质的分离鉴定。2.针对整体柱表面性质较难调控的问题,采用“两步”巯基-烯(thiol-ene)点击聚合反应制备了一种多孔亲水性杂化整体柱。通过与1-硫代甘油反应,疏水性单体八乙烯基倍半硅烷在致孔剂中的溶解性得到了显著提高,然后将其作为前驱体成功制备了杂化整体柱。所制备的杂化整体柱具有连续均匀的网状结构,在cLC应用中显示出典型的HILIC保留机理,最高柱效达65,000 N/m。此外,本研究将肼功能化后的杂化整体材料成功应用于糖肽的富集。3.针对有机聚合物整体柱分离柱效低的问题,首次使用巯基-马来酰亚胺(thiol-maleimide)点击聚合反应直接合成两种高交联的有机聚合物整体柱。所制备的有机整体柱具有良好的热稳定性和机械强度。在5分钟内实现对苯系物的高效分离,最高柱效可达180,500 N/m。此外,对苯酚类、碱性化合物、EPA 610、HeLa酶解液等样品均展现出令人满意的分离效果,为提高有机整体柱对小分子化合物分离柱效提供了一种新思路。