miR-145在乳腺癌发展中的机制研究

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目的:乳腺癌是全世界发病率第二高的恶性肿瘤,仅次于肺癌。在女性人群中,乳腺癌又是发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。近年来许多研究发现非编码RNA在肿瘤中经常出现异常表达。作为研究比较成熟的非编码RNA,miRNA(microRNA)的异常表达与乳腺癌的发生发展密切相关。miRNA是一种小的非编码RNA,长度大约为18~24个核苷酸,通过结合mRNA的3’非翻译区发挥各种功能。本研究旨在寻找一种精确而又可靠的乳腺癌miRNA分子标志物,来达到早期无创诊断的目的,且对其在乳腺癌发展中的作用机制进行初步探讨。方法:首先,通过GEO数据库的数据挖掘,找到乳腺癌组织中相对于正常对照差异表达比较明显的一个miRNA分子。用慢病毒包装插入有miRNA分子前体序列的载体,用慢病毒感染乳腺癌细胞系MCF-7构建稳定高表达目标miRNA分子的稳转株以及对应的阴性对照株。慢病毒感染后,通过细胞增殖实验、集落形成实验、划痕实验以及Transwell迁移和侵袭实检测该miRNA分子对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。同时,对高表达miRNA分子的细胞株和阴性对照进行二代测序,比较两者之间转录组的变化,寻找miRNA可能的靶基因及与之作用机制有关的一些非编码RNA。结果:我们用GEO数据库检索到一个在乳腺癌组织中表达显著下调的miRNA分子miR-145。慢病毒感染后的细胞功能实验结果验证了miR-145对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用。通过二代测序技术和生物信息学分析,我们发现了一组miR-145可能的靶基因以及与之相关的在测序结果中差异表达的非编码RNA,并构建了两个ceRNA调控网络。结论:miR-145在乳腺癌组织中表达下调,miR-145的高表达抑制了乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并可能是通过与一组靶基因的相互作用发挥其负调节作用,一些与之相关的非编码RNA可能也在乳腺癌的发展中起着重要作用。本研究初步探讨了miR-145在乳腺癌发展中的作用机制,为未来对miR-145在乳腺癌的深入研究奠定了基础。
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