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禽1型副粘病毒(Avian paramyxovirus type 1，APMV-1)是副粘病毒科副粘病毒亚科禽腮腺炎病毒属的成员，是危害养禽业最为严重的传染病病原之一，其代表毒株为新城疫病毒(Newcastle Disease Virus，NDV)。其引起的疫病——新城疫被世界动物卫生组织(OIE)列为A类烈性传染病，因此其病原的研究也成为禽病研究的重点和热点。2002年以来，我国浙江、福建等省份部分地区8～40日龄的番鸭发生一种以表现神经症状、呼吸困难、腹泻为主要临床特征的疫病，发病率高达52％，病死率高达30％，经病毒分离鉴定和人工感染试验确定为APMV-1感染。本实验根据GenBank中水禽源禽1型副粘病毒(ZJ1)P基因序列设计2对引物，运用RT-PCR技术从福建分离的1株番鸭源APMV-1(FP1／02株)的基因组中扩增出P全基因的cDNA。测序结果表明，P基因全长144lnt，包含一个完整的开放阅读框架，编码395个氨基酸，通过Genebank的Blast比对分析，有40多株病毒P基因序列同源性较高(同源性在80％以上)，其中与PX2／03株、ZJ1株和SF02株的同源性最高，达97％。同时借助生物学软件及相关在线分析工具对测序完成的P基因进行基于氨基酸序列的生物信息学分析，包括蛋白质理化特性、蛋白质功能域、基序、空间结构等，分析表明P蛋白无信号肽、卷曲螺旋等功能区特征。以测序正确的P基因为模板，用分别含EcoRⅠ、XhoⅠ的一对引物对该目的基因进行亚克隆后插入到pGEX-5X-1原核表达载体中。重组质粒经酶切鉴定和核苷酸序列分析，结果表明所插入的阅读框正确，序列无误，从而成功地构建了pGEX-5X-1／P原核表达载体。将测序正确的重组质粒pGEX-5X-1／P分别转化E．coli BL21(DE3)宿主菌，IPTG诱导表达，SDS-PAGE电泳结果表明pGEX-5X-1／P在E．coli BL21(DE3)获得了高效表达，在相应位置上(68KD处)可见明显的目的蛋白表达带；重组蛋白主要以可溶性蛋白的形式表达；GST亲和层析纯化收集蛋白，纯化后的蛋白经Western-blot和ELISA初步鉴定能与鸭源禽1型副粘病毒P蛋白阳性血清发生特异反应。本试验成功地克隆了FP1／02株番鸭源APMV-1 P基因完整片段，并实现了其在原核表达系统中的高效表达。本试验结果为研究番鸭源APMV-1 P基因编码的各蛋白对不同宿主的免疫原性及在APMV-1跨种间致病等方面的作用和禽1型副粘病毒基因工程疫苗、新型诊断试剂的研制奠定基础。