肝脏是生理和病理状态下，能量代谢，毒素的生物转化以及血浆蛋白合成的中心器官，是机体的最重要的器官之一。急性肝衰竭，晚期肝病或先天性肝病的致死率极高，原位肝脏移植是唯一的有效方法，然而这种方法的广泛应用受到供体肝脏短缺的限制，为此研究者们提出体外肝脏灌注、生物型人工肝、肝细胞移植等技术，以期为肝功能衰竭患者度过肝脏供体等待期或为肝脏自行修复提供代谢支持。肝细胞的质与量为肝细胞移植研究中的关键问题，如何方便的获得足够数量和功能良好的肝细胞己成为广大学者关注的焦点。原代肝细胞在一定的条件下，在短期内还具有体内肝细胞的一些功能和活性，因而增加了原代肝细胞的研究价值。 近年来，随着组织工程化器官和细胞支架研究的兴起，各种生物技术的发展和丝素蛋白性能及应用的研究，使得丝素蛋白组织相容性材料方面的应用得到了广泛的关注，人们尝试将体外培养的高浓度功能相关的活细胞种植于天然的或人工合成的具有良好生物相容性和可降解的聚合物支架上，形成细胞支架复合物，然后将这复合物移植到动物体内组织缺损部位，最后形成一个与基体本身在组织学和生化组成上完全相同的组织，从而完成组织缺损的修复与再造。 本文将丝素蛋白制成丝素膜和微载体的两类载体，将其用于小鼠原代肝细胞培养，测定其存活率及肝功能生化指标。 丝素膜的研制中得到如下试验结果：通过正交试验确定了纯丝素膜的最佳工艺：干燥温度80℃，溶液浓度为15％，搅拌温度为50℃。该条件下丝素膜的溶胀度较高而且溶解率较低符合生物材料的要求；通过与明胶不同配比制得的丝素混合膜需经过一定浓度的乙醇处理，试验确定：丝素蛋白溶液与明胶溶液按4:6配比所得的混合膜(即5样品)性能较好，50％乙醇处理的比75％乙醇处理丝素混合膜性能好，红外光谱分析近一步支持了上述试验结果。 上述两种膜相比较：前者的溶解率较低，但溶胀度却偏低，而生物材料要求溶解率低并且溶胀度高。为进一步比较优劣，进行丝素膜上肝细胞培养研究。研究结果表明：在尿素的合成功能上，明显显示以纯丝素膜为载体培养明显优于以丝素混合膜为载体的培养；其它指标上的优势稍高或等同；而以丝素混合膜为载体的培养稍稍优于普通培养。 微载体培养技术作为一项体外高密度细胞培养技术，兼有单层培养和悬浮培养的优点，己被用于多种贴壁细胞的培养。 微载体制备试验中，丝素蛋白/琼脂微载体的制备试验研究表明：当Tween80的加量为1.0mL，转速为600r/min，丝素蛋白的浓度为0.5％时，丝素蛋白/琼脂微载体的符合微载体的要求，为所求的载体；丝素蛋白/海藻酸钠微载体试验的最佳条件为：海藻酸钠的浓度为1.5％，氯化钙的浓度为0.2mol/L，丝素蛋白的浓度为0.25％。 将上述所得的微载体用于细胞培养，Urea检测结果表明在微载体上培养的肝细胞具有良好的肝功能，微载体培养较丝素膜培养有很大的优势；丝素蛋白/琼脂微载体优于丝素蛋白/海藻酸钠微载体。 上述试验表明，以丝素蛋白为载体培养优于普通培养，丝素蛋白具有良好的生物相容性。 本试验为丝素蛋白在生物材料方面的开发利用提供了依据；对肝细胞体外培养理论与实践方面的探索有一定的意义。