背景研究表明脂肪细胞在抵御细菌感染中起着重要作用,但是相关机制并不清楚。炎症小体是由胞浆内模式识别受体参与组装的多蛋白复合物,可以招募和激活促炎症半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶pro-caspase1,活化的caspase1可以切割IL-1β和IL-18使其成为成熟的细胞因子并引起细胞焦亡的发生。我们研究发现炎症小体受体分子NLRP6在脂肪细胞中的表达量最高,由于NLRP6在脂肪细胞感染细菌后所起的作用并不清楚,因此我们主要研究NLRP6在细菌感染脂肪细胞后所起的作用。目的通过研究在LTA刺激或感染沙门氏菌后,脂肪细胞内NLRP6的表达变化以及caspase1的活化,为脂肪细胞在沙门氏菌感染后所起的作用提供理论依据。方法1.将前脂肪细胞3T3-L1分化成为成熟脂肪细胞,用不同浓度沙门氏菌处理成熟脂肪细胞后,利用q PCR检测脂肪细胞中不同炎症小体受体分子的表达。2.将3T3-L1细胞分化为成熟脂肪细胞,用NLRP6的配体LTA处理后,利用q PCR、Western blot以及ELISA检测NLRP6以及其下游信号炎症因子的表达。3.用不同浓度的沙门氏菌处理脂肪细胞,利用q PCR、Western blot以及ELISA检测NLRP6、ASC、caspase1、IL-1β和IL-18的表达,并检测进入细胞内的细菌载量和对细胞不同死亡方式的影响。4.构建NLRP6过表达质粒,转染3T3-L1分化的成熟脂肪细胞,用不同浓度的野生沙门氏菌处理细胞,利用q PCR、Western blot以及ELISA检测NLRP6、ASC、caspase1、IL-1β、IL-18的表达,并检测进入细胞的细菌数量变化。5.分离NLRP6基因敲除小鼠和WT小鼠的原代性腺脂肪细胞,用野生沙门氏菌处理,利用q PCR、Western blot以及ELISA检测NLRP6、ASC、caspase1、IL-1β、IL-18的表达,并检测进入细胞的细菌数量变化。结果1.不同浓度沙门氏菌处理成熟脂肪细胞后,炎症小体受体的表达量升高,其中以NLRP6的表达量升高最为明显。2.LTA刺激脂肪细胞后,NLRP6及其下游炎症因子ASC、caspase1、IL-1β、IL-18的表达明显增加,caspase1和IL-1β的表达与LTA呈剂量依赖关系。3.以不同浓度沙门氏菌感染脂肪细胞后,NLRP6的表达与细菌感染数量成正比,caspase1和IL-1β下游信号分子的表达量明显增加。4.NLRP6过表达后,用沙门氏菌感染成熟脂肪细胞,进入细胞内的细菌数量明显减少,其下游信号分子表达明显增加。5.敲除NLRP6后,用沙门氏菌感染成熟脂肪细胞,进入细胞内的细菌数量明显增加。结论1.沙门氏菌感染脂肪细胞后会高表达NLRP6以及一些其它的炎症小体受体分子。2.LTA被NLRP6识别并引起下游信号分子的表达增加。3.沙门氏菌激活脂肪细胞内的NLRP6在抵御沙门氏菌感染中起到了重要作用。