非酒精性脂肪性肝病大鼠血清瘦素浓度及肝脏瘦素受体表达的研究

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目的:采用高脂饮食制备大鼠非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD) 模型,检测血清瘦素水平、肝组织瘦素受体的表达与肝组织病理变化的相关性,以阐明瘦素在NAFLD 发病机制中的作用,为有效防治本病提供理论依据。方法: 选用雄性健康Wistar 大鼠40 只,体重200g±15g,正常饲养1 周后,将大鼠随机分为正常对照组及高脂饮食组,每组20 只。正常对照组给予标准饲料;高脂组在标准饲料基础上添加10%猪油、2%胆固醇。于第20 周末将两组大鼠各20 只全部断头处死,取血5ml,以备血清学检查。观察肝脏的颜色、质地,快速称重,取肝右叶组织3 块,分别用于快速冰冻切片,行SudanⅣ染色,观察肝细胞脂变情况; 10%甲醛固定用于HE 染色及Masson 三重染色,观察肝组织的炎症、脂肪变性及纤维化程度;4%多聚甲醛固定用于瘦素受体免疫组化染色,观察肝组织瘦素受体的表达。用日本Olympus AU2700 全自动生化分析仪检测空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、血清甘油三酯(triglyceride,TG),比色法测定血清游离脂肪酸(free fatty acid,FFA),严格按说明书进行操作。用放射免疫法测定空腹血清胰岛素(fasting insulin,FINS)水平,按HOMA 模型计算空腹状态下胰岛素抵抗指数IRI=(FINS×FBG)/ 22.5。用ELISA 法
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