以‘红早酥’(Pyrus bretschneideri Rehd)为实验材料,从中克隆得到了一个可能与花色素苷合成相关的Pb MYB109基因。在此基础上,采用Real-Time PCR技术对Pb MYB109在‘红早酥’及其绿色芽变、果实发育中、不同组织中的表达特性进行了分析。在烟草对Pb MYB109进行亚细胞定位。最后通过瞬时表达和在拟南芥中过表达Pb MYB109,对Pb MYB109基因的功能进行了研究。主要结果如下:(1)从本实验材料中克隆得到一段1086bp的基因,系统发育树分类后显示此基因与拟南芥At MYB109最为接近,故命名为Pb MYB109。Pb MYB109蛋白预测编码361个氨基酸,分子质量336396.86 Da,等电点为7.32。并且在33-130个氨基酸的位置上有两个保守的MYB DNA-binding domain,属于R2R3-MYB转录因子。Pb MYB109和Md MYB10、Fa MYB1、Py MYB10和Vv MYBA1等基因的氨基酸序列相似度很低。与其它调控花色素合成的MYB转录因子相同,Pb MYB109在其R3结构域上同样包含了一组和b HLH蛋白间互作的氨基酸序列。(2)采用Real-Time PCR技术对Pb MYB109的表达特性进行了分析。Pb MYB109在‘红早酥’中的表达量高于其绿色芽变,与之相同的还有Pb ANS、Pb DFR和Pb PAL。在果实发育过程中,Pb MYB109的表达量先降后升。Pb MYB109在‘红早酥’有花色素苷积累的组织中都有所表达,但在不同组织中的表达量与Pb MYB10相差很大。说明Pb MYB109的表达模式与Pb MYB10并不相同。(3)构建Pb MYB109-GFP融合蛋白,在烟草中对Pb MYB109基因进行亚细胞定位。结果表明,仅在烟草叶片中的细胞核中观察到了荧光信号。说明Pb MYB109定位在了细胞核,这与大多数MYB转录因子的定位结果一致。(4)在‘早酥’中对Pb MYB109进行瞬时表达中发现,Pb MYB109能调控Pb ANS、Pb CHI、Pb CHS、Pb F3H、Pb DFR和Pb PAL等基因的表达量上调。(5)构建转基因植物表达载体,把Pb MYB109转入拟南芥中,得到过表达Pb MYB109基因的转基因拟南芥。从表型来来看,转基因拟南芥在莲座叶、种荚和主茎上都出现了明显的花色素苷积累,之后进行的花色素含量测定也肯定这一表型。上述结果表明,本研究克隆得到的Pb MYB109基因可能是一个全新的参与花色素苷合成的转录因子,Pb MYB109可以通过诱导花色素苷合成途径中的结构基因表达从而促进花色素苷的合成。