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沙门氏菌是一种肠道致病菌,其菌型繁多,抗原结构十分复杂,分布广泛,通常通过食品被摄入,尤其是未被烹制完全的蛋类,因而使人体产生自限性的腹泻,并导致全身感染。鸡蛋作为一种重要的膳食原料,其产出与贮存、运输以及销售过程中均存在极大的微生物污染隐患,尤其是沙门氏菌的污染隐患。近年来,关于沙门氏菌病的报道层出不穷,引起了人们的广泛关注。而且沙门氏菌种类繁多,最近不断有新的沙门氏菌被发现。因此,建立一种快速准确的检测方法,对病原菌进行分类和溯源,阻止沙门氏菌的传播和蔓延,是沙门氏菌研究的核心问题。本研究共包括以下3个部分:第一部分:通过对126枚市售九峰养鸡场的新鲜鸡蛋在模拟盛夏37℃、室温20℃以及冷藏4℃条件下蛋壳表面以及蛋内容物的微生物污染情况的检测,结果表明,37℃条件下蛋壳表面总落总数4d可达到1.65×105 cfu,在20℃条件下蛋壳表面4d可达1.32×105cfu,在4℃冷藏21d蛋壳表面菌落总数才达到1.18×105cfu。蛋壳表面菌落总数随着时间的增加而增加,增加率先增加后减小,总体比较缓慢。在鸡蛋内容物中,37℃条件下19 d菌落总数达到7.82×105cfu/mL,20℃条件下34 d菌落总数达到1.25×105cfu/mL,4℃冷藏条件下46 d菌落总数达到2.18×104 cfu/mL。鸡蛋内容物的菌落总数随着时间的增加而增加,增加率比蛋壳表面高。126枚鸡蛋共检测出沙门氏菌9株,检出率为7.14%。其中,肠炎沙门氏菌7株,伤寒沙门氏菌2株。第二部分:对蛋品中分离的9株沙门氏菌菌株和实验室保存的63株的沙门氏菌菌株进行了PCR检测及条件优化。针对沙门氏菌毒力岛(SPI)基因序列,共设计了5组引物,经过筛选,结果表明引物SPI-3特异性好,共检出阳性菌株68株,其检出率为94.4%,扩增片段为500bp的mgtC基因,引物SPI-3的检测限为103cfu/mL。第三部分:对蛋品中分离的9株沙门氏菌菌株和实验室保存的57株沙门氏菌菌株进行了PFGE分型,结果表明,66株沙门氏菌菌株被限制性内切酶Xbal酶切成大小不同的12~18个片段,相似度在40%以上。根据PFGE电泳图谱,按照基因型相似度90%以上分为一个PFGE型,PFGE电泳将66株沙门氏菌共分为18个组型。通过比较沙门氏菌的PFGE图谱和血清学分型结果,同种血清型之间PFGE图谱存在比较相似的情况。有4组PFGE组内血清型相同的情况,除了A群的甲型副伤寒沙门氏菌外,所有PFGE组内都是血清型同一群。