扶正祛毒方及其有效组分抑制骨肉瘤生长的药效性研究

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目的:本论文的研究目的是基于建立裸鼠原位移植瘤模型,验证扶正祛毒方在体内治疗骨肉瘤的有效性,用智能型纳米胶束载体包裹扶正祛毒方中抑制骨肉瘤生长的有效单体雷公藤甲素(TP),进一步探讨负载TP的纳米胶束(TP-TPBC-PEG)与光动力疗法协同治疗骨肉瘤的作用。方法:1.通过体内实验验证扶正祛毒方抗骨肉瘤的作用建立原位异种移植骨肉瘤裸鼠模型,观察扶正祛毒方对骨肉瘤体积和重量、裸鼠肝脾肾脏器指数的影响,HE染色肿瘤组织,观察形态2.体外筛选扶正祛毒方中抑制骨肉瘤细胞存活率的有效成分用Cell Counting Kit-8试剂盒检测并筛选扶正祛毒方中能显著抑制骨肉瘤细胞存活率的有效中药单体3.扶正祛毒方中抑制骨肉瘤细胞存活率的有效单体雷公藤甲素靶向治疗骨肉瘤的作用研究(1)制备出包载有效单体雷公藤甲素的智能型纳米胶束(2)通过纳米粒度仪和透射电子显微镜对合成后的纳米胶束进行表征检测,紫外分光光度计检测吸收光谱(3)在不同pH的环境下,体外检测雷公藤甲素释放效率(4)通过CCK-8,细胞克隆、细胞迁移、细胞浸润实验检测雷公藤甲素与光动力协同抑制骨肉瘤细胞的生长(5)利用小动物活体成像检测负载雷公藤甲素的纳米胶束药物在裸鼠肿瘤部位的富集效率(6)观察检测雷公藤甲素与光动力协同抑制肿瘤体积、肿瘤重量、裸鼠生存率及肺转移情况结果:1.低剂量的扶正祛毒方可抑制胫骨内原位骨肿瘤模型裸鼠肿瘤的生长,高剂量组对裸鼠的肝肾具有一定的毒性2.扶正祛毒方中有效成分雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷公藤内酯甲呈时间和浓度依赖性降低143B骨肉瘤细胞的存活率,雷公藤甲素与重楼皂苷Ⅰ、毛蕊异环酮联合使用具有协同抑制骨肉瘤细胞存活率的作用。3.成功构建了负载雷公藤甲素的智能型纳米胶束。雷公藤甲素与光动力联合治疗骨肉瘤,能减少给药次数和给药剂量,在有效抑制骨肉瘤生长的同时,显示出较低的体内毒性。结论:低剂量的扶正祛毒方能够抑制骨肉瘤在体内的生长。对雷公藤甲素进行剂型改造后,能再减轻毒性的基础上,雷公藤甲素被动靶向与光动力疗法协同治疗能够有效的抑制骨肉瘤的生长。
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