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鹅肉是理想的高蛋白、低脂肪和低胆固醇的健康食品,深受消费者青睐,因此开展鹅产肉性能品种改良具有重大的经济效应。探究在鹅骨骼肌组织中发挥重要作用的功能基因,并深入了解鹅骨骼肌生长发育调控的分子机理,是开展遗传育种的重要基础。CTRP3(C1q/tumor necrosis factor-related protein-3)是近期发现的参与肌肉生长发育过程的重要因子,与骨骼肌细胞分化调控密切相关,但其在鹅骨骼肌发育过程中的调控作用尚未明晰。本研究以浙东白鹅为研究对象,包含以下部分研究:(1)通过酶消化法体外分离骨骼肌卫星细胞,利用骨骼肌卫星细胞增殖期特异性标记基因进行免疫荧光鉴定,并且诱导骨骼肌卫星细胞分化,建立在体外细胞培养条件下稳定传代的细胞分化模型;(2)通过qRT-PCR检测鹅胚胎发育过程中CTRP3基因的表达情况,并检测该基因在骨骼肌卫星细胞诱导分化后的表达情况;利用真核表达载体pCDNA3.1构建CTRP3基因过表达载体,通过过表达和沉默CTRP3基因,检测CTRP3及其与分化相关标志基因的mRNA和蛋白表达水平;(3)利用生物信息学软件预测和筛选可能靶向调控CTRP3基因的重要miRNA,通过骨骼肌卫星细胞的转染试验,结合qRT-PCR和Western blot检测候选miRNA以及CTRP3基因的表达,进一步推测候选miRNA对CTRP3基因的调控作用。结果表明,(1)体外成功分离培养鹅骨骼肌卫星细胞,并构建能够稳定传代的体外分化模型,用于后续相关实验研究;(2)成功获得了鹅骨骼肌发育过程CTRP3的表达谱;通过过表达和干扰试验,进一步证实CTRP3能够调控鹅骨骼肌卫星细胞的分化;(3)通过生物信息学预测并结合实验初步分析发现miR-129-5p可能作用于鹅CTRP3基因。