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目的:
通过建立体外感染柯萨奇病毒(CVB3)大鼠乳鼠心肌细胞的模型，探讨益心康对体外感染CVB3的大鼠乳鼠心肌细胞的保护作用，初步分析其对细胞凋亡相关因子Fas/Fasl的影响，为中药复方益心康的进一步临床应用奠定了理论基础。
方法:
1.原代心肌细胞培养:取出生1-3天的SD大鼠乳鼠，消毒，开胸，取心，清洗，取心尖部心室肌，剪碎。用胰蛋白酶消化，收集上清离心，加培养基将沉淀吹打均匀，差速贴壁1小时，去除成纤维细胞，将未贴壁的细胞悬液放置培养瓶中培养，隔日换液。每日于倒置荧光显微镜下观察心肌细胞。
2.常规Hela细胞培养。
3.病毒扩增并测CVB3病毒半数组织感染量(TCID50)
4.提取益心康药液。
5.测益心康药液提取液及利巴韦林注射液作用于心肌细胞时的最大无毒剂量(TCID0)。
6.实验分组及药物干预:取已贴壁生长长势良好的心肌细胞，分成四组:正常细胞对照组，病毒对照组，益心康治疗组，利巴韦林治疗组。分别于培养24小时、48小时时在倒置荧光显微镜下观察细胞病变(CPE)，若病毒对照组CPE出现100％（++++）时，立刻停止培养。
7.指标的检测:
(1)倒置荧光显微镜下观察24小时及48小时心肌细胞各组形态学变化及细胞病变(CPE)。
(2)用RT-PCR方法检测各组心肌组织中Fas、FasLmRNA的表达
8.统计分析
实验结果:
1、益心康组的细胞病变轻于利巴韦林组。
2、益心康组细胞给药48小时后的Fas、FasLmRNA的表达较病毒组降低，有统计学差异(p＜0.05）。益心康组及利巴韦林组减轻Fas、FasLmRNA的表达效果无明显差异(p＞0.05）。
结论:
1、益心康可以减轻细胞病变，对心肌细胞有保护作用。
2、益心康可有效减轻细胞凋亡相关因子Fas、FasLmRNA的表达水平。