论文部分内容阅读
第一部分TrkB受体激动剂7,8-DHF对左旋多巴诱发帕金森病异动症大鼠行为学影响的研究目的:探讨酪氨酸激酶B受体(TrkB)激动剂7,8二羟基黄酮(7,8-DHF)对左旋多巴(L-DOPA)治疗帕金森病(PD)诱发异动症大鼠行为学的影响方法:SD大鼠于右内侧前脑束立体定向注射6-羟基多巴(6-OHDA.),建立单侧毁损PD大鼠模型。成功构建PD模型的60只大鼠随机分为生理盐水(NS)、L-DOPA、L-DOPA+7,8-DHF(5mg/kg)、L-DOPA+7,8-DHF(10mg/kg)、L-DOPA+7,8-DHF(20mg/kg)和7,8-DHF(20mg/kg)六个组别,每组10只。连续腹腔注射L-DOPA或NS21天,并于此之前30分钟腹腔注射5mg/kg、1Omg/kg、20mg/kg TrkB受体激动剂7,8-DHF或空白溶剂,每天两次。实验大鼠在给药治疗的第2、9、11、18、21天进行异常不自主运动(AIM)、毁损对侧前肢跨步数、旋转反应时间等行为学测试。结果:1、L-DOPA+7,8-DHF(10mg/kg)组在观察的第9、11、18天轴性AIM评分较 L-DOPA 组显著下降(P<0.05);L-DOPA+7,8-DHF(10mg/kg)组第 9、11、18、21 天肢体、口舌及总的AIM评分较L-DOPA组显著下降(P<0.05);L-DOPA+7,8-DHF(20mg/kg)组第9、11、18、21天轴性、肢体、口舌及总的AIM较L-DOPA组明显下降(P<0.05)。然而5m/kg的7,8-DHF并没有改善LID大鼠的行为((P>0.05)。2、L-DOPA+7,8-DHF组左前肢跨步数和对侧旋转反应时间较L-DOPA组无明显差异(P>0.05)。结论:腹腔预给药7,8-DHF能够改善L-DOPA诱发的PD大鼠的异动症行为,不影响L-DOPA治疗PD大鼠运动症状的疗效。第二部分TrkB受体激动剂7,8-DHF对左旋多巴诱发帕金森病异动症大鼠纹状体内TrkB受体影响的研究目的:评价腹腔注射7,8-DHF对黑质酪氨酸羟化酶(TH)蛋白含量、纹状体内TrkB受体、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)磷酸化水平及脑源性神经营养因子(Bdnf)转录水平的影响。方法:NS、L-DOPA、L-DOPA+7,8-DHF(20mg/kg)和7,8-DHF(20mg/kg)四个组大鼠在第21天行为学检测结束后处死,取各组大鼠黑质、纹状体。免疫印迹(WB)检测黑质内TH蛋白表达量和纹状体内TrkB受体、CREB磷酸化水平;Q-PCR测定纹状体内Bdnf转录水平;免疫荧光检测黑质内多巴胺能神经元数量。结果:1、7,8-DHF组与NS组相比,毁损侧黑质内TH蛋白含量无显著差异(P>0.05)。2、L-DOPA+7,8-DHF(20mg/kg)组双侧纹状体内 pTrkB 水平较 L-DOPA组显著升高(P<0.01);7,8-DHF组双侧纹状体内pTrkB水平较NS组升高(P<0.001)。3、L-DOPA+7,8-DHF(20mg/kg)组大鼠毁损侧纹状体pCREB表达水平以及Bdnf转录水平较L-DOPA组毁损侧显著增加(P<0.05)。结论:7,8-DHF可以通过结合纹状体TrkB受体并使其磷酸化,激活其下游的CREB,上调Bdnf转录水平。