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目的:建立慢性不可预见性温和应激小鼠模型;观察慢性不可预见性温和应激对小鼠卵巢反应性、卵母细胞发育潜能的影响,探讨与卵母细胞发育潜能相关的局部调控因子BDNF是否参与了慢性不可预见性温和应激对小鼠卵巢反应性和卵母细胞发育潜能的影响。方法: (1)利用孤养、饥饿、冷水游泳等连续温和应激相继施与小鼠30天,建立慢性不可预见性温和应激雌性小鼠模型,旷场试验检测行为学、ELISA方法检测血清学皮质酮、免疫组化方法检测下丘脑CRH阳性神经元变化鉴定慢性应激动物模型。(2)观察PMSG+HCG促排卵后的获卵数、卵母细胞孤雌激活后体外培养至囊胚阶段观察慢性应激对卵巢反应性和卵母细胞发育潜能的影响。(3)透视电子显微镜观察卵母细胞和颗粒细胞超微结构、卵巢组织免疫组化方法检测卵巢BDNF水平探讨慢性应激对小鼠卵巢卵巢反应性和卵母细胞发育潜能可能的机制。结果: (1)通过连续30天的慢性不可预见性温和应激后,行为学检测显示小鼠中央格停留时间延长、水平运动和直立运动明显减少;血清学检测显示慢性应激后小鼠皮质酮水平明显升高;免疫组化方法显示慢性应激后下丘脑室旁核CRH阳性神经元增多。(2)慢性应激后小鼠促排卵获卵数明显减少;卵母细胞孤雌激活后体外培养,囊胚形成率显著降低。(3)慢性应激后透视电子显微镜下观察小鼠卵巢超微结构显示卵母细胞与颗粒细胞间缝隙连接破坏、颗粒细胞凋亡增多;卵巢组织免疫组化结果显示卵巢窦卵泡、成熟卵泡内BDNF表达降低。结论:慢性不可预见性温和应激后小鼠行为学呈抑郁样改变、HPA轴活性升高,说明小鼠处于应激状态;慢性应激后小鼠获卵数减少、囊胚形成率降低,提示慢性应激降低了卵巢反应性和卵母细胞发育潜能;慢性应激小鼠卵泡内颗粒细胞凋亡增加、卵母细胞与颗粒细胞间的缝隙连接破坏;慢性应激可致窦卵泡和成熟卵泡内BDNF表达水平下降。以上结果提示慢性应激可能通过抑制卵巢内自分泌和旁分泌因子BDNF的表达,进而抑制小鼠颗粒细胞生长和增殖,并抑制卵母细胞和颗粒细胞之间的缝隙连接交流,从而对卵泡的生长,卵母细胞的发育潜能产生影响。